本文对禽流感GD/1/96株的M2基因进行了克隆与序列测定，并在昆虫细胞（sf9）中表达了M基因，同时研制了一种经济有效的抗禽流感新药，旨在为我国禽流感的新型疫苗的研制、快速诊断以及化学防制奠定基础。具体内容如下： 1．取感染GD1/9620小时的未死SPF鸡胚的尿囊膜、肌肉等组织研磨、匀浆，提取总RNA。利用反转录—聚合酶链反应（RT-PCR）技术，扩增出编码M2蛋白的cDNA，以pMD18-T为载体克隆转化到感受态的大肠杆菌中，经酶切和PCR分析鉴定后，测定全基因的核苷酸序列。测序结果表明克隆到M2基因的cDNA全长为311bp，包括整个阅读框297bp，编码97个氨基酸残基。由于M2蛋白可作为新一代的流感疫苗，因而M2基因的成功克隆可为M2蛋白的大量表达和新型疫苗的研制奠定基础。 2．从pUCM1质粒中亚克隆M基因至转移载体pFastBacl质粒，PCR鉴定后，转化DH10_BAC感受态细胞。提取重组bacmid杆粒rBacM，以M13为引物作PCR分析，证明M基因已转入其中。用CellFECTIN试剂包裹rBacM杆粒转染sf9细胞，96h收取感染细胞。细胞表达产物裂解后作SDS-PAGE蛋白电泳和Western-blot，证明M基因在昆虫细胞中成功表达且具有与天然M1蛋白具有相似的活性。琼扩试验表明重组M1蛋白可作为诊断抗原。 3．针对禽流感病毒的复制特点和致病机理，我们研制了抗流感新药‘呼毒灵’。并对其抗病效果及其对细胞免疫的影响进行了研究。将96只30日龄AIV阴性AA肉鸡平均分为5组，第1组不接毒，不给药；第6组静脉接种（i.v.）未感染病毒的鸡胚尿囊液0.2ml/只。第2、3、4、5组i.V.感染病毒的鸡胚尿囊液0.2ml/只(2.09×10^{9 23}EID₅₀)，其中第5组作为接毒对照，其余在接毒前8h饲喂自配1、2、3号药。同时用30只健康AA肉鸡平均分为3组，作1、2、3号药的安全性试验。接毒后，每天观察鸡群，将死亡的鸡作病理解剖。在PI的第4天无菌翅静脉采血1ml作淋转，观察鸡只的细胞免疫功能的变化。结果表明：给1号药的第2组鸡只死亡率、感染率均最低，与第5组相比较P＜0.01，差异极显著；给3号药组与第5组相比差异显著P＜0.01。淋转结果表明，给1、3号药组与感染对照组相比，差异极显著，细胞转化能力有明显的提高。这说明‘呼毒灵’1、3号药有很好的防治AI的能力。