糖皮质激素抑制骨骼纵向生长机制的研究

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目的通过对生长板的研究,探讨糖皮质激素抑制骨骼纵向生长的机制,为临床防治糖皮质激素所致生长迟缓提供理论支持。方法3周龄清洁级雄性SD大鼠20只。随机分为地塞米松组12只,对照组8只。地塞米松组大鼠每天腹腔注射地塞米松200μg/100g体重,对照组大鼠注射等容积生理盐水,连用10天。每日称量体重。宰杀日采集静脉血,测量鼻尾长,胫骨长。制备胫骨生长板组织切片。1、以胫骨长反映骨骼纵向生长情况,通过Masson三色法、Mallory三色法等组织学特殊染色方法,显示生长板软骨细胞形态,直接测量生长板厚度、增殖带和肥大带厚度。2、采用免疫组化技术观察糖皮质激素受体、信号分子TGF-B1和Ihh在生长板的表达情况。3、通过ELISA法测定血清浓度,探讨地塞米松处理对GH-IGF-I轴组分、骨形成标志物-骨钙蛋白、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原羧基端前肽和骨生长参数C型钠尿肽的影响。SSPSS14.0统计软件处理数据。结果用x±s表示。进行独立样本t检验,P<0.05为有显著性差异。结果第3天起,地塞米松组大鼠每日体重净增长明显低于对照组大鼠;第6天起,地塞米松组大鼠体重显著落后于对照组大鼠;10天后,地塞米松组大鼠体重、鼻尾长、胫骨长、生长板总厚度、增殖带厚度、肥大带厚度都显著落后于对照组大鼠。地塞米松组大鼠血清IGF-I水平显著低于对照组大鼠,而生长激素水平显著高于对照组大鼠。两组之间在IGFBP-3、骨钙蛋白、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原羧基端前肽和C型钠尿肽血清水平没有明显差异。生长发育阶段大鼠胫骨生长板静止带软骨细胞和肥大带软骨细胞表达糖皮质激素受体,而增殖带软骨细胞不表达糖皮质激素受体。地塞米松处理使生长板静止带和肥大带软骨细胞糖皮质激素受体表达增强。大鼠生长板肥大带软骨细胞表达TGF-β1,地塞米松处理可使其表达增加。大鼠生长板增殖带与肥大带交界区域(成熟带)软骨细胞表达Ihh,地塞米松处理后Ihh表达减少。结论1、糖皮质激素可通过对生长板直接作用而影响骨骼纵向生长。2、药理剂量糖皮质激素可能通过上调其受体在生长板的表达,发挥抑制骨骼纵向生长的作用。3、药理剂量糖皮质激素使生长板肥大带软骨细胞TGF-β1表达增强,参与对骨骼纵向生长的抑制。4、药理剂量糖皮质激素可能通过降低成熟带软骨细胞信号分子Ihh的表达抑制骨骼纵向生长。5、糖皮质激素所致生长迟缓的细胞学病理基础为抑制静止带干样细胞活化为增殖软骨细胞,并且抑制肥大软骨细胞分化。
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