目的:小G蛋白在调控蛋白转运过程中发挥重要作用。近年来,小G蛋白对心肌离子通道(膜蛋白)的调控作用日益受到重视,目前相关的研究主要集中在钾离子通道和钙离子通道的调控方面,但到目前为止,未见有关小G蛋白通过调控囊泡运输影响心肌纳离子通道表达和功能的文献报道。本项目拟分别在异体细胞(HEK293 细胞过表达Na_v1.5),通过定量(Westernblot)、定位(confocal),研究小G蛋白Sar1和Arf1对纳通道蛋白转运的调控模式,为研究SCNA基因(Na_v1.5)引起相关疾病的发病机制和今后以干预囊泡转运过程为靶点设计药物进行此类疾病的靶向治疗提供新的思路。方法:在这个实验中,我们使用HEK 293细胞作为宿主细胞。将SCNA基因转染到HEK293细胞中,通过G418筛选稳定表达SCNA基因的细胞系。为了检测小G蛋白对Na_v1.5的调节效应,野生型或突变型的小G蛋白SAR1和ARF分别转染到HEK293-Na_v1.5细胞系(异体细胞)。通过免疫印迹和免疫荧光这两种技术来分析实验过程中所得到的结果。利用免疫印迹对目标蛋白进行定量,利用免疫荧光对细胞内的目标蛋白进行定位。结果:我们发现,过表达突变的SAR1不仅减少了细胞膜上的Na_v1.5,细胞内总的Na_v1.5的表达也显著减少。另一方面,ARF对于Na_v1.5在细胞内的表达及定位的影响较小。结论:这项研究表明,小G蛋白参与调节Na_v1.5在细胞内的运输。Sar1对于Na_v1.5的运输调控更加明显。因此,今后应进一步研究小G蛋白,尤其是Sar1,以促进我们对它的理解及其在心律失常中的潜在作用和治疗意义。