化疗是治疗结肠癌的一种非常重要的手段,然而细胞耐药性经常导致化疗失败。因此找到一种耐药逆转剂就具有重大意义。芹菜素是天然黄酮类化合物,能够抑制P-gp、bcl-2表达,抑制肿瘤细胞的生长。本实验希望阐明芹菜素对结肠癌HCT116/L-OHP细胞耐药逆转作用及其相关机制。采用MTT法测定芹菜素对细胞增殖的抑制作用,并得到无毒剂量(即抑制率低于10%的浓度);通过奥沙利铂与无毒剂量的芹菜素联用,MTT实验测定芹菜素耐药逆转作用;应用流式细胞术测定敏感组,耐药组,耐药芹菜素组,耐药维拉帕米组中罗丹明123的蓄积情况;流式细胞术检测耐药组,耐药L-OHP组,联用组中细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR检测敏感组,耐药组,耐药芹菜素组中P-gp,bcl-2的mRNA表达水平;Elisa法检测敏感组,耐药组,耐药芹菜素组中的P-gp、p-Akt、p-IκBα、IκBα、bcl-2、bax、caspase-3蛋白表达水平。实验结果表明:芹菜素给药24、36、48小时的无毒剂量分别为90、50、40μmol/L;芹菜素给药24、36、48小时的逆转指数分别为1.33、1.51、2.06;与耐药组相比,耐药芹菜素组中罗丹明123蓄积量明显增加(p<0.01);与耐药L-OHP组相比,联用组的凋亡率明显上升(p<0.05);与耐药组相比,耐药芹菜素组P-gp、bcl-2基因mRNA表达水平明显降低(p<0.01);与耐药组相比,耐药芹菜素组的P-gp、p-Akt,p-IκBα、bcl-2蛋白表达水平降低,bcl-2/bax值减少,IκBα、caspase-3蛋白表达水平明显提高(p<0.05-0.01)。芹菜素40μmol/L给药48h具有最佳的逆转作用,逆转指数2.06,其逆转机制可能与抑制P-gp的功能,下调P-gp、bcl-2蛋白表达,上调bax、caspase-3蛋白的表达水平,启动caspase级联反应,提高细胞的凋亡率相关。