脑多头蚴病（Coenurus cerebralis）是草食动物养殖业中常见的一种寄生虫疾病,是由多头带绦虫（Taenia multiceps）的中绦期幼虫脑多头蚴引起,因常寄生于宿主脑部也称其为脑包虫病,有时也会寄生于肌肉和皮下等组织。该病常导致宿主的死亡,往往引起发展中国家牛羊养殖行业的严重经济损失。本研究在多头带绦虫转录组中筛选出膜联蛋白基因（ANXB2、ANXB3、ANXB12）,对其进行了基因扩增与原核表达、免疫印迹、荧光免疫组化定位分析和荧光定量PCR,同时结合生物信息学相关方法对多头带绦虫膜联蛋白的功能和分子特征进行了描述;此外,本研究在现有研究基础上,使用r Tm16和r Tm GST分别制备基因工程亚单位疫苗对山羊脑多头蚴病的保护效果进行了初步评价,期待为牛羊脑多头蚴病疫苗研究提供新的思路。一、脑多头蚴膜联蛋白（B2、B3、B12）的原核表达与特征分析膜联蛋白（Annexin）是一类结构保守的蛋白质家族,普遍具有钙依赖的磷脂绑定特性,在各种真核组织细胞中有广泛分布。本研究从多头带绦虫成虫转录组数据中筛选得到三种膜联蛋白基因（Anx B2、B3、B12）,并进行了克隆表达,结果显示Anx B2、Anx B3和Anx B12基因大小分别为1065 bp、933 bp和957 bp,对应编码354、310及318个氨基酸,其中所获的r Tm Anx B12是不稳定蛋白。生物信息学分析发现三种膜联蛋白都具有四个重复域,同时Anx B2结构中缺少钙离子绑定位点,取而代之的是一个KDG序列。对r Tm Anx B2和r Tm Anx B3进行免疫印迹发现两者均能被感染脑多头蚴的山羊阳性血清识别,具有一定的免疫原性。间接免疫荧光定位显示膜联蛋白B2主要分布于幼虫的头节区,而膜联蛋白B3在成虫与幼虫均有分布。荧光定量PCR结果显示Anx B3在头颈节和未成熟节片中转录水平较高,而Anx B2和Anx B12主要在六钩蚴和脑多头蚴中有较高的转录。二、脑多头蚴Tm16、Tm GST蛋白对山羊脑包虫病的免疫效果评价多头带绦虫16 k Da基因属于带科绦虫16 K基因家族的一员,具有较好的免疫保护性,GST蛋白是各种生物体内能量代谢中重要的酶蛋白,是一种公认的疫苗候选分子。为评价Tm16蛋白与Tm GST蛋白对山羊脑多头蚴病的免疫保护性,本研究对试验组山羊分别皮下免疫三次r Tm16蛋白,r Tm GST蛋白以及r Tm16+r Tm GST蛋白,定时采集血清,末次免疫后2周,所有山羊经口感染约5500个多头带绦虫活虫卵,于105 d后剖解。结果发现,Tm16+Tm GST组山羊较对照组获得87.5%的减囊率,其保护效果最好（P=0.005）。血清特异性抗体检测显示,混合组山羊血清中抗r Tm GST-Ig G水平与抗r Tm16-Ig G水平差异不显著（P>0.05）,而在单疫苗组中两者具有统计学差异（P<0.05）。表明r Tm16与r Tm GST的配合使用能够诱导山羊产生更高抗体水平并获得较显著的保护力。