获得性免疫缺陷综合征（Acquired Immunodeficiency Syndrome,AIDS）是机体感染人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）引起的疾病。HIV主要入侵宿主的CD4+T细胞,造成人体免疫系统的瘫痪。高效抗逆转录病毒疗法（Highly Active Anti-Retroviral Therapy,HAART）的大规模使用使得艾滋病向功能性治愈前进了一大步。然而,我们也看到,虽然HAART可以将血浆病毒载量（Viral load,VL）压至检测线以下,但需长期服药。一旦停止用药,血浆病毒会再次反弹。这主要是由于病毒潜伏库的存在,它是现今艾滋病患者治愈的主要障碍。因此,如何清除潜伏的病毒对于艾滋病治愈性研究来说是至关重要的一步。潜伏病毒主要存在于HIV感染者的静息CD4+T细胞中,将静息CD4+T细胞中HIV的潜伏期进行逆转,通过免疫介导的方式进行杀伤是一种有希望的策略。第一部分:IFN-α2诱导的CD8细胞应答对SIV潜伏/激活态CD4细胞的杀伤作用研究。虽然HAART治疗可以使HIV感染者血浆病毒载量低于50 copies/mL,但患者体内储存库细胞基因组中仍然整合着少部分有活性的前病毒DNA。当停止使用HAART后,会迅速翻译包装形成新的病毒,使得血浆病毒载量反弹。目前认为,静息CD4+T细胞是主要的病毒储存库。与清除潜伏病毒相关的研究主要在于逆转静息CD4+T细胞中的HIV潜伏期,进而通过免疫介导的方法靶向杀伤病毒感染的靶细胞。IFN-α是由浆细胞样树突状细胞（pDC）分泌的细胞因子,可以调节CD8+T细胞,促进其对感染靶细胞的杀伤作用,在免疫应答中发挥着重要的作用。其中IFN-α2己经在临床上用于治疗HCV感染。除了抗病毒作用外,IFN-α还可以作为免疫细胞调节剂,增强免疫效应细胞的功能。因此,本研究主要探索经IFN-α2处理的CD8+T细胞对于激活的潜伏艾滋病毒的杀伤效果及其作用机制。本研究中,我们用IFN-α2预处理感染SIV恒河猴的CD8+T细胞,随后将其与经PMA和离子霉素激活的感染猴CD4+T细胞/静息CD4+T细胞进行合并培养,通过测定胞内SIV P27抗原、胞内病毒RNA和上清病毒载量的水平来判定激活的CD4+T细胞被杀伤的情况,继而对IFN-α2加强CD8+T细胞杀伤功能的机制进行了探究。结果发现,CD8+T细胞对潜伏病毒被激活的CD4+T和静息CD4+T细胞有一定的杀伤作用,IFN-α2明显加强了这种作用。IFN-α2作用于CD8+T细胞,通过释放perforin和Granzyme B,增加了靶细胞裂解,而不是通过加强诱导靶细胞的凋亡实现其杀伤功能。IFN-α2提高CD8+T细胞的免疫应答,有效清除潜伏病毒被激活的CD4+T细胞,为艾滋病功能性治愈提供了新的治疗方向。第二部分:诱导刺激猴外周血单核淋巴细胞亚群活化增殖研究。在许多免疫系统疾病的研究中,T细胞激活和增殖程度可以反映疾病的进展状况。T细胞刺激剂是研究T细胞激活和增殖常用的一种手段,常用的T细胞刺激剂为PMA+Ionomycin、α-CD2/α-CD3/α-CD28、PHA-P+IL-2 等,T 细胞被刺激剂活化后,CD69、CD38 和HLA-DR等活化分子的表达会上调。在本研究中,用 PMA+Ionomycin、α-CD2/α-CD3/α-CD28、PHA-P+IL-2 三种 T细胞刺激剂作用于外周血单个核细胞（PBMC）,流式细胞术检测CD69、CD38、HLA-DR和Ki67这四种T细胞活化增殖分子的表达,通过比较几种不同T细胞刺激剂的活化效果,以期为T细胞激活相关研究选择合适的刺激剂奠定实验基础。流式细胞术结果表明,在刺激剂作用72h时,与其它两种刺激剂相比,α-CD2/α-CD3/α-CD28刺激后的CD4+T细胞和CD8+T细胞上的CD69和Ki67表达量更高,HLA-DR+CD4+T细胞和HLA-DR+CD8+T细胞的比例与另外两组组间比对无差异,同时CD38的表达量在α-CD2/α-CD3/α-CD28与PHA-P+IL-2组间比较无统计学差异（P>0.05）;在PMA+Ionomycin刺激下,检测到上述四种分子的表达量都很低。综上可得,α-CD2/α-CD3/α-CD28活化T细胞效果最佳,PHA-P+IL-2次之,PMA+Ionomycin作用弱。在选择T细胞活化作用程度方面,可进行针对性选择。