论文部分内容阅读
目的:通过采集ASO患者外周血EPCs,以中成药补气活血通脉丸进行干预,观察补气活血通脉丸对ASO患者外周血EPCs数量及功能的影响,研究补气活血通脉丸对动脉硬化闭塞症的治疗作用途径。方法:1、ASO患者外周血EPCs的培养和鉴定用密度梯度离心法分离获得ASO患者外周血单个核细胞,将其接种于预先包被好人纤维连接蛋白的培养瓶,加入DMEM培养基,培养4d,换液,培养至6d,收集贴壁细胞,置于激光共聚焦显微镜下,用流式细胞仪鉴定血管内皮祖细胞(EPCs)。2、补气活血通脉丸对ASO患者外周血EPCs数量和增殖、迁移、黏附功能的影响取培养6天的EPCs,随机分组:对照组、补气活血通脉丸30g/L组、补气活血通脉丸60g/L组、补气活血通脉丸90g/L组。用含空白血清及30g/L、60g/L、90g/L补气活血通脉丸含药血清的EBM-2培养基培养72h后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,分别采用细胞计数法、吸光度、Transwell小室法观察EPCs的数量,增殖、迁移、黏附功能。结果:1、EPcs的培养和鉴定培养至第6天的单核细胞形态成长为梭型内皮样细胞。置于激光共聚焦显微镜下鉴定,Dil.acLDL和FlTC.UEA—I双染色阳性细胞是正在分化的EPCs,流式细胞仪分析显示,培养至第6天表达CD34、CDl33和VEGFR-2的细胞分别为(18.2土6.3)%、(28.5±7.2)%和(77±6.4)%。2、补气活血通脉丸对ASO患者外周血EPCs数量及功能的影响结果表明:与对照组相比,30g/L、60g/L、90g/L补气活血通脉丸含药血清均能显著增加EPCs的数量,显著改善EPCs迁移、增值、黏附能力。以60g/L剂量补气活血通脉丸含药血清对EPCs数量和功能影响效果明显。结论:补气活血通脉丸能显著改善ASO患者外周血EPCs数量及功能,这可能是其防治动脉硬化闭塞症的作用机制之一。