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随着工业化的进程,石油的开采和应用得到迅猛发展。然而,在石油的开采、炼制和加工过程中,产生了大量含油土壤,其中,柴油污染现象显得尤为普遍。柴油是一种由烷烃、芳烃和脂肪物质组成的复杂混合物,由于其中大部分化合物在水中溶解度低,严重限制了柴油中烃类的生物可降解性。因此,在自然状态下土壤中柴油的分解氧化速度缓慢。生物表面活性剂作为由微生物合成的、分子结构中同时具有不同的亲水基和疏水基的一类化合物,具有分散、增溶、润湿、渗透、低毒性、可降解性、生态相容性、高效性和稳定性等性能。分析认为,生物表面活性剂可以通过两个途径提高柴油的生物可利用率:一方面,它能促进烃类等难溶物质在水溶液中扩散,并渗入细胞内部被分解;另一方面,生物表面活性剂能通过调节细胞表面的疏水性能来影响微生物细胞与烃类物质的亲和力等作用,有效提高降解菌对柴油的降解效率。实验运用微生物培养方法,从某饭店排污口污泥样品中初筛出7株表面活性剂产生菌。经一系列的菌株筛选实验,获得1株产表面活性剂高效菌B26,这株菌株能使复筛发酵液的表面张力从67.2mN/m降低到36.8mN/m。经UV2550紫外-可见分光光度计测定,菌悬液在600nm波长处有最大吸收峰。经生态学鉴定B26菌株属于枯草芽孢杆菌。以正交法设计实验方案,对筛选的样品菌株B26的发酵环境进行了优化研究。实验得出B26菌的最佳生长条件为:K2HPO4 4.0g/L,KH2PO4 10.0g/L,CaCl2.2 H2O 0.1g/L,NaCl 1g/L,KCl 1g/L,(NH4)2SO4 1g/L,NaNO3 2g/L,MgSO4·7H2O 0.2g/L,酵母浸膏0.4g/L,可溶性淀粉1g/L,EDTA 1g/L,KI 0.83μg/L,H3PO4 0.01μg/L,CoCl·6H2O 0.048μg/L,MnSO4·H2O 0.312μg/L,Na2MoO4·2H2O 0.048μg/L,ZnC12 0.287μg/L,CuSO4·5H2O 0.125μg/L,初始pH值7.5,温度30℃、转速170rad/min。B26菌株培养液的乳化能力稳定,临界胶束浓度为130mg/L。利用冷冻干燥法提取的生物表面活性剂产量为0.57g/L。为了研究产表面活性剂菌在柴油微生物降解过程中所产生的影响,实验分别将B26等7株产表面活性剂菌株与柴油降解菌(实验室提取的另一株假单胞菌)共同作用,结果显示,投加B26菌不仅可以将降解诱导期从原来的6天缩短至4天,而且能将降解率由原来的71.1%提高至80.6%,具有较大的研究价值。通过实验研究,在表面活性剂菌株和降解菌降解柴油的过程中,柴油初始浓度、菌株接种时间、氮源添加量等因素分别对柴油的降解效率产生一定的影响。希望在本次实验的基础上探索出一条处理大规模柴油污染土壤和水体的研究方法。