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第一部分ARPC4在膀胱尿路上皮癌组织中表达情况与淋巴结转移的关系目的:检测膀胱尿路上皮癌(BUC)组织中ARPC4的表达情况,探讨ARPC4表达与膀胱尿路上皮癌临床病理参数及淋巴结转移的关系。方法:收集2012年1月至2015年1月期间我院198例膀胱尿路上皮癌患者行根治性膀胱切除术后病理标本及患者临床资料,随机选取40例正常膀胱组织病理标本及40例阳性淋巴结作为对照。采用组织芯片方式收集组织标本,使用免疫组化染色法检测ARPC4表达情况,分析ARPC4表达同膀胱癌患者年龄、性别、大小、数量、肿瘤分期、分级、以及淋巴结转移之间的关系,应用多因素Logistic回归分析膀胱癌淋巴结转移预测因素。结果:ARPC4主要表达于阳性细胞胞质及细胞核中,BUC组织中ARPC4表达水平明显高于正常膀胱组织,阳性表达率分别为84.3%和27.5%(P<0.001)。ARPC4表达水平与BUC大小、数量、病理分级、肿瘤分期、淋巴结转移显著相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示仅ARPC4表达水平为BUC发生淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05)。结论:ARPC4在BUC组织中相对于正常膀胱组织高表达,是BUC淋巴结转移的独立预测因子。第二部分沉默ARPC4对膀胱癌T24细胞株增殖迁移能力的影响目的:研究ARPC4对膀胱癌T24细胞生物学行为的调控,探讨沉默ARPC4基因对膀胱癌T24细胞伪足、骨架、增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:采用脂质体转染si RNA-ARPC4干扰片段,构建稳转的膀胱癌T24细胞株,采用半定量RT-PCR检测si RNA-ARPC4转染效率,Western blot检测转染后ARPC4和下游cofilin-1蛋白的表达变化,实验设置si RNA-ARPC4实验室组、si RNA-NC阴性对照组和si RNA-N空白对照组,利用稳转膀胱癌T24细胞株通过CCK-8实验、Transwell小室迁移实验、划痕修复实验、细胞免疫荧光实验检测ARPC4沉默后对T24细胞增殖、侵袭、迁移和细胞伪足和骨架的影响。结果:转染si RNA-ARPC4后膀胱癌T24细胞中ARPC4 m RNA表达水平显著下调,与si RNA-NC阴性对照组和si RNA-N空白对照组相比表达差异均具有统计学意义(P<0.05),ARPC4 m RNA表达抑制率为73.68%。ARPC4蛋白和下游cofilin-1蛋白表达水平较si RNA-NC阴性对照组和si RNA-N空白对照组均明显下降,并且差异均有统计学意义(P<0.05),si RNA-A RPC4沉默ARPC4表达的稳转膀胱癌T24细胞增殖能力以及细胞侵袭与迁移能力较si RNA-NC阴性对照组和si RNA-N空白对照组均降低,且差异均有统计学意义(P<0.05),并且细胞伪足生成障碍,而造成T24细胞生物学行为降低可能与ARPC4对细胞伪足的形成的调控有关。结论:沉默ARPC4基因的表达能显著抑制膀胱癌T24细胞的增殖、侵袭、迁移能力和伪足形成。