流行性感冒（简称流感）是流感病毒引起的急性呼吸道传染病,也是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。接种流感疫苗是目前公认的预防流感发生与传播最有效的方法。目前,市场上销售的流感疫苗,主要是流感病毒裂解疫苗。流感疫苗是流感病毒单价原液通过混合、过滤、分装制得。其中,流感病毒裂解疫苗单价原液的生产是流感疫苗生产过程中的关键步骤,能够直接影响流感疫苗的质量与安全。目前工业化生产流感病毒裂解疫苗单价原液采用9-11日龄孵化后鸡胚进行病毒培养、经过收获病毒液、纯化、裂解、灭活过滤后获得流感病毒抗原。也有实验关于采用MDCK细胞培养的流感疫苗研究^[1][2]。流感疫苗生产过程持续时间长,工艺复杂,为获得安全、有效和稳定的流感病毒裂解疫苗,本文对鸡胚生产流感病毒裂解疫苗单价原液生产过程中的关键技术进行研究。世界卫生组织每年根据全球监测情况来推荐当年度的流感疫苗生产毒株,用以预防世界上不同国家和地区出现常见和严重的流感病毒。HA（血凝素）是流感病毒表面的主要抗原蛋白,通过它引起人体内的免疫应答反映流感疫苗的有效性。卵清蛋白是采用鸡胚生产流感疫苗过程中不可避免的杂质,能够引起人体不良反应。所以HA的高回收率和卵清蛋白的高去除率是提高流感疫苗有效性和降低不良反应的重要指标。对流感疫苗的经济性和安全性有重要影响。本文研究了H1N1、H3N2、B株3种毒株工作种子批在不同稀释倍数下接种至11日龄鸡胚,在一定培养温度下进行病毒培养,收获病毒液,测定血凝滴度。确定病毒培养工艺如下:H1N1、H3N2接种于11日胚龄,培养温度34℃、培养60小时收获尿囊液;B株接种于11日胚龄,培养温度34℃、72小时后收获尿囊液。收获尿囊液后采用蔗糖密度梯度离心法去除卵清蛋白。通过加入非离子型裂解剂（辛苯醇醚-9）裂解病毒,能够有效将病毒裂解。加入PBS溶液后透滤,去除裂解剂辛苯醇醚-9。加入甲醛分别在室温约25℃和2-8℃条件下灭活病毒裂解液。经过0.2um过滤器过滤稀释后得到单价病毒液。通过对以上流感病毒裂解疫苗单价原液关键技术研究,稳定了流感病毒裂解疫苗单价原液的生产工艺,为流感疫苗大批量生产提供可靠保证。