【摘 要】
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目的探究长链非编码RNA(Lnc RNAs)HOTAIR在急性髓细胞白血病(AML)中的表达,以及AML细胞对柔红霉素(DNR)耐药的分子机制。方法收集温州医科大学附属第一医院血液科AML患者来源的骨髓单个核细胞50例(AML原代细胞)、捐献者骨髓单个核细胞10例、温州医科大学附属第一医院内科实验室保种AML细胞株(HL60、THP1、U937、KG1、Kasumi-1、NB4、HEL、Kasum
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目的探究长链非编码RNA(Lnc RNAs)HOTAIR在急性髓细胞白血病(AML)中的表达,以及AML细胞对柔红霉素(DNR)耐药的分子机制。方法收集温州医科大学附属第一医院血液科AML患者来源的骨髓单个核细胞50例(AML原代细胞)、捐献者骨髓单个核细胞10例、温州医科大学附属第一医院内科实验室保种AML细胞株(HL60、THP1、U937、KG1、Kasumi-1、NB4、HEL、Kasumi-3)及293T细胞株。以正常捐献者骨髓单个核细胞为对照组,q RTPCR检测HOTAIR在AML原代细胞、AML细胞株、对照组的表达。选取THP1细胞、U937细胞作为进一步研究对象,构建sh-HOTAIR、sh-NC,并分别转染上述两株细胞。用终浓度为0.1μmol/L柔红霉素(DNR)处理转染后细胞,并用CCK8实验检测细胞增殖情况,运用流式细胞术分别检测细胞凋亡情况。q RT-PCR检测转染后细胞中HOTAIR的表达,western blot检测转染后细胞的P-糖蛋白的表达。结果本研究发现:q RT-PCR仪检测结果显示HOTAIR在AML原代细胞和AML细胞系中表达明显高于对照组;CCK8结果显示:下调HOTAIR的表达,细胞增殖减缓。流式结果显示:下调HOTAIR的表达细胞凋亡增加,下调HOTAIR的表达合并DNR作用细胞凋亡率高于仅下调HOTAIR或仅用DNR的细胞。western blot结果显示:下调HOTAIR的表达,细胞内P-糖蛋白的表达也同样下调。结论1.HOTAIR在急性髓细胞白血患者和AML细胞系中呈高表达;2.异常表达的HOTAIR可能与急性髓细胞白血病细胞的增殖,凋亡密切相关;3.异常表达的HOTAIR可能通过调控P-gp表达,影响AML细胞对柔红霉素的耐药;4.该研究的结果可能为急性髓细胞白血病对柔红霉素的耐药提供新思路及线索。
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