HIF-1α/EphrinA1信号通路在糖尿病因素削弱七氟醚心肌保护作用中的机制研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxiaolong1314
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目的:在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中,七氟醚后处理的心肌保护作用消失。本实验拟探讨七氟醚的心肌保护作用消失是否与糖尿病因素抑制HIF-1α/Ephrin A1信号保护通路有关。方法:健康成年雄性SD大鼠,体重210 g-260 g,采用腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素(Steinbeis-Transferzentrum,STZ)联合高脂高糖饲料持续喂养8周的方法制成2型糖尿病(Tapy 2 diabetic mellitus,T2DM)大鼠模型。取造模成功的60只大鼠,按照随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)、七氟醚后处理组(SP组)、低氧诱导因子1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)激活剂DMOG组(DMOG组)、HIF-1α激活剂DMOG加七氟醚后处理组(SP+DMOG组)。Sham组在心脏左冠脉前降支(Left anterior descending coronary artery,LAD)只穿线不结扎血管,其余各组采用结扎LAD 30 min,再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型(Myocardial ischemia repurfusion injury,MI/RI)。SP组和SP+DMOG组采用在松开结扎线的前5 min吸入2.5%的七氟醚维持15 min。DMOG组和SP+DMOG组在手术前24 h腹腔注射DMOG 40 mg/kg。于再灌注120 min时,取下心肌组织,采取抽签法每组抽取4只大鼠心肌标本,采用TTC染色法测定心肌梗死面积;剩余8只大鼠取结扎线以下的心肌组织分为2部分:一部分制成石蜡切片用于HE染色观察心肌病理学损伤和免疫荧光共定位观察HIF-1α、Ephrin A1的位置关系,一部分采用Western blot法测量心肌组织中HIF-1α和Ephrin A1的蛋白含量。结果:与Sham组相比,其余四组心肌梗死面积增大,病理学损伤加重,HIF-1α、Ephrin A1蛋白表达下调(P<0.05)。与I/R组相比,DMOG组和SP+DMOG组心肌梗死面积缩小,病理学损伤减轻,HIF-1α、Ephrin A1蛋白表达上调(P<0.05)。SP组与I/R组相比上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。DMOG组与SP+DMOG组相比心肌梗死面积缩小,病理学损伤减轻,HIF-1α和Ephrin A1蛋白表达上调(P<0.05)。免疫荧光共定位显示:HIF-1α和Ephrin A1均主要分布于心肌细胞的细胞质里,且二者可能存在交互作用。结论:七氟醚的心肌保护作用消失可能与糖尿病因素抑制HIF-1α/Ephrin A1信号保护通路有关。
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