三嗪等3类分子印迹材料制备及其应用研究

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分子印迹技术(molecular imprinting technique,MIT)是为获得在空间结构和结合位点上与某一分子(印迹分子,模板分子)完全匹配的聚合物的实验制备技术。分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymer,MIP)具有特异识别及可再生重复使用等优点,已被应用于食品安全、医学、环境等多个领域,特别是分子印迹固相萃取技术,在各个研究领域中得到了广泛应用。本研究以3类食品安全危害因子为研究对象,进行了分子印迹聚合物制备及应用研究。针对分子印迹技术存在的模板渗漏、传质慢、粒径不均一等问题,研究制备了虚拟模板MIP和表面MIP,并进行分子印迹固相萃取应用;同时结合磁性纳米粒子快速分离特性,基于荧光标记三聚氰胺与三聚氰胺竞争结合磁性印迹聚合物结合位点的原理,创新建立了三聚氰胺分子印迹荧光竞争快速分析方法,并应用于牛奶基质中三聚氰胺的快速检测。主要研究内容和研究结论如下:1、研究建立了17种三嗪类农药分子印迹固相萃取-液相色谱串联质谱分析方法。分别以莠去津和扑草净为模板优化并制备了两种分子印迹聚合物,将两者混合作为填料制备复合分子印迹固相萃取柱。结果表明:该固相萃取柱能够选择性吸附3类17种三嗪类农药,对结构不相似的环嗪酮、氰草津不吸附。应用于玉米、小麦和棉花基质三嗪类农药的残留检测,添加回收率为61.1%-107.6%,RSD为2.0%-10.7%,检出限为0.4μg/kg-5.0μg/kg。2、研究建立了基于分子印迹技术的三聚氰胺样品前处理方法和检测方法。三聚氰胺又名2,4,6-三氨-1,3,5-三嗪,具有三嗪母环结构,本研究探索将三嗪类化合物用于三聚氰胺虚拟模板分子印迹聚合物的制备。结果显示:优选的虚拟模板解决了模板渗漏问题,提高了方法的可靠性。(1)研究建立了三聚氰胺虚拟模板分子印迹固相萃取-液相色谱串联质谱分析方法。优化筛选了两种虚拟模板2-氯-4,6-二氨-1,3,5-三嗪和2-甲基-4,6-二氨-1,3,5-三嗪,合成了两种虚拟模板分子印迹聚合物,并对其识别、结合等功能特性进行研究表征。分别将其应用于牛奶基质三聚氰胺的净化富集,添加回收率为74.6%-87.1%,相对标准偏差(RSD)小于10%。(2)以纳米硅球为载体,制备2-氯-4,6-二氨-1,3,5-三嗪表面分子印迹聚合物并应用于固相萃取。在丙烯基修饰的硅球表面合成了厚度约为30 nm的印迹聚合物,对其吸附性能和形态进行了评价和表征。将其应用于牛奶基质三聚氰胺固相萃取,添加回收率为80.9%-86.5%,RSD为4.9%-6.4%。与(1)相比,缩短了固相萃取时间,提高了样品前处理效率和稳定性。(3)以Fe3O4纳米粒子为载体,制备2-甲基-4,6-二氨-1,3,5-三嗪磁性表面分子印迹聚合物,将其作为模拟抗体,创新研究建立了三聚氰胺分子印迹荧光竞争快速分析方法。结果表明:荧光竞争物浓度不变,三聚氰胺浓度与荧光竞争物结合率呈负线性相关,线性范围为0.05 mg/L-80 mg/L,检测限为0.05 mg/L。采用该方法检测牛奶中三聚氰胺,添加回收率为70.2%-85.3%。3、研究氯霉素虚拟模板分子印迹聚合物在氯霉素样品前处理中的应用。以甲砜霉素为虚拟模板,合成了能够特异性吸附氯霉素的分子印迹聚合物,建立了牛奶基质中氯霉素分子印迹固相萃取-液相色谱串联质谱分析方法,添加回收率为72.9%-81.2%,RSD小于8.3%。
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