银杏GbCOL及GbMADS8基因的克隆和表达

来源 :中南林业科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whzjs
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
银杏(Ginkgo Biloba L.),又名公孙树,属裸子植物门(Gymnospemae),银杏科(Ginkgoaceae)银杏属(Ginkgo),单属单种,是原产于我国的一种古老的木本裸子植物。银杏是一种非常重要的经济林树种,具有极高的经济价值和研究价值。本研究从银杏不同生长发育时期叶片、茎端及花转录组数据库中筛选到两个可能与开花相关的基因GbCOL及GbMADS8,对其进行了克隆及功能分析。主要研究结果如下:  1、银杏GbCOL基因及GbMADS8基因的克隆及生物信息学分析。根据银杏不同时期叶片、茎端及花转录组数据库中该基因的ORF序列设计特异引物,以成年银杏叶片的cDNA为模板进行PCR扩增得到全长CDS序列,GbCOL全长CDS序列为1239bp,GbMADS8全长CDS序列为861bp;并利用在线软件对基因序列进行了生物信息学分析,结果表明:GbCOL基因和GbMADS8基因分别属于CO家族基因和MADS-box家族基因,其功能可能与开花相关。  2、GbCOL基因及GbMADS8基因的表达量分析。采用qPCR分析方法,分别对GbCOL基因在银杏4、5、9月成年树叶,和4、9月幼年树叶中GbCOL基因的表达量进行分析。结果表明:GbCOL基因在9月成年树叶中的表达量最高,其次是5月成年树叶、4月成年树叶、9月幼年树叶、4月幼年树叶。同时采用qPCR分析方法对GbMADS8基因在银杏4、5、9月成年茎端,和4、9月幼年茎端及花中GbMADS8基因的表达量进行分析。结果表明:GbMADS8基因在花中的表达量最高,其次是4月成年茎端、5月成年茎端、9月成年茎端、4月幼年茎端、9月幼年茎端。  3、银杏GbCOL基因的原核表达。构建原核表达载体pET-32a(+)-GbCOL,利用IPTG诱导pET-32a(+)-GbCOL重组蛋白,表达出了一条大小约为45kDa的融合蛋白。  4、银杏GbCOL基因功能在拟南芥中的初步验证。构建植物超量表达载体pBI-121-GbCOL,重组转化农杆菌菌株GV3101,采用花序浸染法转化拟南芥花序,收获种子后,通过抗性培养筛选阳性植株,自交繁殖2代后获得T2代转GbCOL基因植株。
其他文献
数学是现实世界数量关系和空间形式的反映,数学中各部分知识相互联系,应用题作为小学数学的一部分,它的数量关系是有内在联系的。如何优化小学数学应用题的教学,是当今小学数学教
《数学新课程标准》指出,数学教学是数学活动的教学,是师生之间、学生之间交往互动与共同发展的过程课堂教学是学生在校期间学习科学文化知识的主阵地,也是对学生进行思想品德教
1.初中语文课堂的创新教学的实践  心理学理论认为初中学生的思维一般是"经验型"的,而不是"理论型的,即在进行抽象思维时,需要具体、直观的感性经验作支撑。而主要的感性认识和经
目的:研究神经阻滞麻醉对近端髓内钉治疗高龄股骨粗隆间骨折术后谵妄的降低效果.方法:以我院2019年5月~2020年6月30日治疗的40例高龄股骨粗隆间骨折的患者为研究对象,按照抽签
目的:讨论损伤控制外科技术在急诊外科多发伤救治过程中的应用价值.方法:选取多发伤患者80例随机分为两组.参照组接受常规急救措施,观察组在急救过程中应用损伤控制外科技术.
本文以初中生数学思维现状分析为切入点,试从具体形象思维、抽象逻辑思维、发散思维以及思维的持续性和思维的批判性等方面,初探如何培养初中生数学思维能力。
目的:观察补肾清肝方治疗经期痤疮的临床疗效.方法:将60例经期痤疮患者随机分为补肾清肝组与西药组各30例,分别予以补肾清肝方中药治疗和头孢氨苄胶囊治疗,两组各治疗2个疗程
意识是指人的头脑对现实的反映能力,创新意识则指这种能力达到有创见的新水平。在教学中培养学生的创新意识尤为重要,它是实施素质教育的重要内容,如何培养学生创新意识,教师应采
"提出一个问题往往比解决一个问题更重要。"传统的数学课堂教学都是老师提出问题,这不符合新课程、新理念。要学生自己提出问题,解决问题。数学课堂上如果没有问题,那才是最大的"问
1概况陈凹楼矿是一座设计能力为240万t/a的特大型现代化矿井,1997年11月正式投产,采用立井单水平上、下山开拓,煤种系优质无烟煤,为低瓦斯矿井,煤层无自然发火倾向,煤尘亦无爆炸危险