重组人B7新型外毒素融合蛋白的构建、表达、纯化及其生物学活性的初步研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:he110521
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我们根据细胞因子-受体导向杀伤新理论,壅在国际上探索性研制构建了重组B7-PE40新型外毒素融合蛋白,融合蛋白中的B7可与T细胞表面的CD28/CTLA4受体特异性结合,从而可特异性地介导PE40进入T细胞内并将其杀伤,清除体内移植反应性T细胞,最后达到选择性诱导免疫耐受的目的.为了得到具有生物活性的B7-PE40融合蛋白,该研究分别用HiTrap Blue亲和层析柱和Chitin Beads对pBV220和pTYB4重组表达质粒表达产物的包涵体上清进行了初步纯化,得到了电泳纯融合蛋白,Western-blot显示所纯化的融合蛋白与B7-1、B7-2及PEA抗体均发生特异性结合,证实融合蛋白的空间构象及抗原性均无改变.单向淋巴细胞混合实验(MLC)检测初步证实我们所构建、表达、纯化的B7-PE40融合蛋白对移植排斥反应有抑制作用,有望成为特异性诱导的T细胞免疫耐受的新型药物.
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