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素馨花为木犀科茉莉属植物素馨花(.Jasminum officinale L.var. grandiflorum)的干燥花蕾,又名素馨针、耶悉茗花,世界各地广为栽培,具有疏肝解郁、行气止痛之功效。我国民间用其治疗消化不良、十二指肠球部溃疡及慢性肝炎、肝硬化等症。素馨花主要化学成分为环烯醚萜苷类、黄酮类和三萜皂苷类化合物,其中环烯醚萜苷类化合物主要为橄榄苦苷。近年来,随着国内外学者对橄榄苦苷研究的不断深入,发现其具有许多药理活性,引起人们的广泛关注。橄榄苦苷具有抗VHSV、HIV、 HBV等病毒的作用;抗肿瘤作用;抗氧化作用;降血糖作用;对心血管系统的作用;对物质代谢的影响;抑菌活性和抗炎作用等一系列药理活性。素馨花中总环烯醚萜苷为主要活性成分,总环烯醚萜苷主要为橄榄苦苷,橄榄苦苷是一种苯酚类裂环烯醚萜苷,橄榄苦苷易溶于乙醇、丙酮、吡啶等,可溶于水、丁醇、乙酸乙酯,几乎不溶于乙醚、石油醚、氯仿等。目前为止国内外还未有关于素馨花中总环烯醚萜苷提取分离纯化工艺优化的文献报道,故本研究拟先采用正交试验法对素馨花中总环烯醚萜苷提取工艺进行优选并制定质量标准,再以聚酰胺树脂为固定相,选择适当的流动相,应用常压柱色谱分离纯化素馨花药材总环烯醚萜苷中的橄榄苦苷,旨在探索一种快速提取、分离和纯化素馨花药材有效成分的简单实用方法并最终确定最佳的提取分离纯化工艺,本研究还拟制定总环烯醚萜苷和橄榄苦苷的含量测定方法及质量标准。为素馨花药材的进一步开发利用及其总环烯醚萜苷的生物活性研究提供实验基础,为之后的药理活性实验奠定基础。第一部分素馨花总环烯醚萜苷提取工艺的研究目的:研究素馨花中总环烯醚萜苷的最佳提取工艺。方法:以橄榄苦苷作为对照品,通过紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量,计算总环烯醚萜苷收率(按药材计算)为评价指标,采用L9(34)正交实验法对水冷浸、水煎煮、醇冷浸、醇回流的各个因素进行考察。结果:水冷浸最佳条件为A3B3C3,即用12倍量蒸馏水冷浸提取3次,每次72h;水煎煮最佳条件为A3B1C3,即用16倍量蒸馏水煎煮3次,每次1h;醇冷浸最佳条件为A2B1C3,即用12倍量60%乙醇冷浸提取3次,每次48h;醇回流最佳条件为A3B3C1,即用12倍量60%乙醇回流提取3次,每次2h。各种方法的最优组合所得的总环烯醚萜苷收率差别不大。结论:用12倍量60%乙醇冷浸提取3次(每次48小时)的提取方法可以获得较高的提取率,并且稳定可行。该研究考察的提取工艺具有良好的稳定性和重复性,可为素馨花药材的进一步开发利用提供科学依据。第二部分素馨花中橄榄苦苷纯化工艺的研究目的:研究素馨花中橄榄苦苷的纯化工艺及结构鉴定。方法:用聚酰胺树脂富集纯化总环烯醚萜苷,即以聚酰胺为分离载体,样品液浓度为1g/ml,上样量为干浸膏(g)/聚酰胺(g)=1:10,上样后静态吸附1h,先用2BV蒸馏水洗脱除杂,再用15%乙醇溶液洗脱,以高效液相色谱法测定橄榄苦苷含量。测定橄榄苦苷的1HNMR、13CNMR、MS等波谱图,根据理化性质和波谱数据确定橄榄苦苷的结构。结果:用高效液相色谱法测定所得干浸膏中橄榄苦苷的含量占总量的80%以上。用聚酰胺制备板得到橄榄苦苷纯品,可用于结构鉴定。根据理化性质IR、HNMR、CNMR、MS等波普数据确定橄榄苦苷的结构。结论:本实验通过不断地预实验确定以聚酰胺为分离介质,富集纯化素馨花中总环烯醚萜苷及橄榄苦苷的工艺,为以后素馨花药材药理活性的研究奠定了基础。第三部分素馨花总环烯醚萜苷提取物质质量标准草案目的:研究素馨花中总环烯醚萜苷和橄榄苦苷的含量测定方法及制定素馨花总环烯醚萜苷提取物质质量标准草案。方法:采用颜色反应、薄层色谱法进行鉴别,建立了紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷含量和高效液相色谱法测定橄榄苦苷含量的分析方法。结果:建立了紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷含量和高效液相色谱法测定橄榄苦苷含量的分析方法。总环烯醚萜苷的标准曲线为:A=0.0289C-0.0049(R2=0.9998),3.96-19.80μg/mL的范围内线性关系良好,平均回收率值为102.64%,RSD=0.65%(n=6)。橄榄苦苷的标准曲线为Y=133959x+23.44(R2=0.9998)0.02.0.10mg/mL线性关系良好,平均回收率为100.12%,RSD=0.883%(n=6)。结论:该方法稳定、准确、精密度高、专属性强、操作简便可行,适用于提取工艺和纯化工艺优化过程中的含量测定。