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第一部分:验证lncRNA AL139280.1在糖尿病肾病患者中的表达及临床意义目的:验证AL139280.1在糖尿病肾病患者中的表达,探讨AL139280.1的表达在糖尿病肾病患者蛋白尿发生中的作用及其与临床指标的相关性。方法:1、收集人肾组织标本:收集正常对照组和糖尿病肾病组的肾组织标本。正常对照组的肾组织标本来源于肾肿瘤非糖尿病患者手术切除肿瘤组织周围的正常肾组织,糖尿病肾病组来源于肾穿刺活检确诊的糖尿病肾病患者肾组织。所有标本均来源于山东大学附属省立医院。（1）RNA荧光原位杂交（RNA-FISH）标记AL139280.1合并免疫荧光标记足细胞标志蛋白Podocin,观察AL139280.1在肾脏组织的表达和分布。（2）肾脏组织HE、PAS、Masson染色观察肾脏组织病理学的改变。（3）透射电镜观察足细胞超微结构改变。2、收集人血浆标本:收集正常对照组和糖尿病肾病组的血标本。离心后收集血浆。所有标本均来源于山东大学附属省立医院。（1）real-time PCR检测AL139280.1在血浆中的表达。（2）收集正常对照和糖尿病肾病患者的收缩压、舒张压、糖化血红蛋白、血白蛋白、血尿素氮、血肌酐、血尿酸、血脂、ACR、肾小球滤过率等指标,并用统计学方法分析血浆AL139280.1的相对表达水平与上述临床指标的相关性。结果:1、RNA-FISH结果显示AL139280.1在糖尿病肾病患者的肾小球中表达明显升高,与足细胞标志蛋白Podocin共染显示,AL139280.1与足细胞存在共定位,且糖尿病肾病患者足细胞发生损伤时,AL139280.1在足细胞中的表达上调。2、HE、PAS、Masson染色显示糖尿病肾病患者肾小球基底膜增厚,系膜基质增多。3、电镜结果显示,肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,足细胞足突出现融合。4、与正常对照组相比,AL139280.1在糖尿病肾病患者的血浆中表达明显上调,且大量白蛋白尿的患者血浆AL139280.1的表达明显高于微量白蛋白尿患者。Spearman’s相关性分析表明血浆AL139280.1相对表达水平与ACR（rs=0.546,P<0.001）等具有相关性。结论:LncRNA AL139280.1在糖尿病肾病患者的肾脏组织和血浆中表达明显上调,与ACR呈正相关,其可能通过损伤足细胞导致糖尿病肾病的肾脏损伤。第二部分:明确AL139280.1在高糖诱导的足细胞损伤中的作用目的:探讨AL139280.1是否参与了高糖刺激诱导的足细胞损伤,以及AL139280.1在高糖刺激诱导的足细胞损伤中的作用。方法:1、将永生化人足细胞分为:低糖组（LG:5.5mmol/L葡萄糖）,高糖组（HG:30 mmol/L葡萄糖）、高渗对照组（HO:5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇）,培养 48 h后,real-time PCR检测 AL139280.1 的表达;RNA-FISH检测AL139280.1的表达和定位;real-time PCR、Western Blot和免疫荧光检测足细胞损伤标志物Desmin、ZO-1的表达及分布情况;鬼笔环肽-FITC染色观察足细胞骨架的改变。2、构建AL139280.1过表达和敲低载体,并进一步将足细胞分为:低糖组（LG）、高糖组（HG）、高糖+敲低对照组（HG+si-NC）、高糖+AL139280.1敲低组（HG+si-AL139280.1）、低糖+空载体组（LG+OE-NC）、低糖+AL139280.1过表达组（LG+OE-AL139280.1）。real-time PCR 检测 AL139280.1 过表达和敲低效率;real-time PCR、Western Blot和免疫荧光检测调控AL139280.1后足细胞损伤标志物Desmin、ZO-1的表达及分布情况;鬼笔环肽-FITC染色观察调控AL139280.1后足细胞骨架的改变。结果:1、高糖培养永生化人足细胞48h后,AL139280.1在足细胞的表达明显上调（P<0.05）,RNA-FISH结果显示AL139280.1主要分布在足细胞的细胞核内。2、real-time PCR、Western Blot和免疫荧光结果显示高糖培养永生化人足细胞48h后,足细胞损伤标志物Desmin明显上调,ZO-1明显下调（P<0.05）;鬼笔环肽-FITC染色显示高糖导致足细胞的细胞骨架发生重排。3、real-time PCR、Western Blot和免疫荧光结果显示敲低AL139180.1可减轻高糖诱导的Desmin上调、ZO-1下调,减轻足细胞损伤,而过表达AL139280.1可以促进足细胞损伤的发生。鬼笔环肽-FITC染色显示敲低AL139280.1可抑制高糖状态下的足细胞骨架重排,而过表达AL139280.1则促进骨架重排的发生。结论:LncRNA AL139280.1在高糖诱导的足细胞中表达上调,且调控AL139280.1可以影响高糖诱导的足细胞损伤和骨架重构,提示AL139280.1可能在糖尿病肾病足细胞损伤中发挥重要作用。