失血性休克(HS)是外科常见危重急症，继发脏器损伤是HS的重要并发症。急性肺损伤(ALI)常常在HS后的脏器损伤中最先出现，易发展为急性呼吸窘迫综合征，甚至多脏器功能衰竭，死亡率高达50％～70％。目前研究认为，肠源性内毒素血症是HS继发ALI的主要原因。IκB激酶(IKK)-β是核因子(NF)-κB活化的关键上游分子，主要作用是磷酸化降解NF-κB抑制因子(IκB)，暴露NF-κB核定位序列，是NF-κB发挥基因转录调节功能的前提。NF-κB是一种广泛存在的快反应转录因子，可上调炎症因子的基因转录而引发炎症瀑布反应，诱导肺损伤。山莨菪碱是从唐古特山莨菪中提取出来的一种生物碱，具有多种生物学作用，尤其是山莨菪碱的细胞保护作用和抗炎作用倍受关注。本实验通过HS和内毒素(ET)双重打击制备动物ALI模型，观察肺组织中IKK-β的表达、NF-κB的活化情况以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中NF-κB下游因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的含量变化，探讨IKK-β在HS继发ALI的病理机制中的作用；同时观察山莨菪碱对ALI的保护效应，从分子水平探讨山莨菪碱的抗炎机理，证实一干预 IKK－NF－K B信号通路对防止 HS后 ALI的发生发展可能是一个有效的途径，为临床HS后ALI的预防和治疗提供实验基础。 方法：健康成年家兔 45只，随机分为三组：正常对照组比组，15只），模型组（M组，15只），山莫若碱治疗组叮组，匕只）。实验动物经3％戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉u0m叭g人行右侧股动脉分离插管术，接三通用于监测血压、放血和复苏。快速放血诱发休克，15分钟内使平均动脉压降至30mlnHg左右，维持该水平60ndn，回输全部失血复苏，T组动物同时腹腔注射山苔若碱0mg／kg人 M组动物注射等量生理盐水代替。60Inin后动物腹腔注射大肠杆菌脂多糖（LPS，O钻：B。，10 u Wg人 C组动物不诱发休克，注射等量生理盐水代替 LPS和山莫奢碱。各组动物分别于模型制备完毕后 Zh、6h、24h取材：全自动血气分析仪检测动脉血氧分压0 ＼ 酶联免疫吸附试验检测BALF上清中TNF a和 IL－6的含量；原位杂交和免疫组织化学方法结合图象分析分别检测肺组织 IKK一 BmRNA、NF－。B p65蛋白表达、分布及相对含量；苏木精一伊红染色光学显微镜下观察肺组织病理变化。 结果：①HS和ET刺激后，M组动物PZOZ迅速降低，6h降至最低水平7二1上1．18 ea，24h仍维持在9．32土0．95 kPa，与C组比较均有明显差异（P叼刀1，＊＜0刀5人T组动物P acaO。下降明显减轻，6h达到最值9二5土0。90 wa，但明显高于同时点M组（P＜0刀5），24h基本恢复至正常水平（P＞0刀5）。②HS和ET刺激后，M组各时点动物肺组织均出现不同程度的炎症反应，6h炎症反应最为严重。T组动物肺组织炎症反应明显减轻。③HS和ET刺激后，BALF中TNF－日的含量迅速升高，Zh即达峰值0．147士0．015 n咖l，6h下降至0．098土0．olong／ffil，与C组比较均有显著差异（P＜0刀1），24h基本恢复到正常水平（尸＞0．05）；1＊－6的含量在刺激后缓慢升高，6h达到峰值o 118士0．013ng／thl，24h降至 －5－一0．094士0．0＊n咖1，与C组比较均有显著差异（P＜0．01）。经山度若碱治疗后，其含量均有下降，分别在Zh和6h下降最为显著，与同时点M组比较均有显著差异（P＜0刀1）。④IKK一plnRNA原位杂交阳性产物呈棕黄色颗粒，分布于细胞质中；正常对照组肺组织中IKK一plnRNA呈微弱阳性表达。图象分析显示，在HS和ET刺激后，肺组织中IKK．6InRNA阳性产物的相对含量迅速增加，6h达到峰值 0．200土 0刀 19，24h降至0刀76土0刀10，与C组比较均有显著差异（P＜0刀1）；经山莫著碱治疗后，其相对含量依然高于C组（P＜0刀1，P＜ 0刀5人 但与M组比较有明显下降（P＜0．of人⑤NF K B p65免疫组化阳性产物呈棕黄色颗粒，位于细胞核或评细胞质中。HS和ET刺激后Zh，细胞质和细胞核中均可见到较多棕黄色颗粒；6h点阳性产物主要位于细胞核内；24h棕黄色颗粒主要位于细胞质中；正常对照组肺组织中 N’F几 B p65呈弱阳性表达，位于细胞质中。图象分析显示，M组动物肺组织中 NF心 B p65阳性产物的相对含量明显增加，6h达到峰值0．16po0．0I7，24h仍维持在较高水平0．09土0刀09，与C组比较均有显著差异（P＜0刀1）；经山莫若碱治疗后，其相对含量依然高于C组（P＜0刀1），但与M组比较有明显下降 （P＜o．01，P＜0刀5）。 结论：①M组动物肺组织中 IKK小 MA的表达、MJ B p65的活化以及BALF中TNF－a、IL－6的含量均明显增加，并与肺组织炎症反应程度、PaO。降低程度相关；IKKplnRNA的表达和 NF儿 B p65的活化在HS、ET刺激后Zh即达较高水平，6h达到峰值，ITNF－a的释放高峰在Zh，而IL．6的释放高峰在6h，并同时伴有严重的肺组织炎症反应。提示机体受到 HS和 ET刺激后，可增加 IKK－p的表达，促进NF－。B的活化和核移位，从而上调 TNF－口和 IL－6的基因转录；INI7－口作为细胞因子网络的启动因子，?