大豆异黄酮包括游离型和结合型两种,发挥活性的主要是游离型的大豆苷元(大豆素、黄豆黄素、染料木素),它可以由结合型糖苷转化而来。天然、工业生产以及市售的大豆异黄酮中,大豆苷元纯度并不是很高,而且价格不菲,因此,为实现大豆苷元纯度的提高,深入研究结合型糖苷向苷元的转化,针对单一的市场,开发出合理有效的联合处理技术以及大豆苷元的产品制备尤为关键。本文以市售大豆异黄酮粉为原料,采用碱化、高压、固定化酶解联合处理技术,提高大豆苷元转化率,处理后的酶解液经大孔树脂纯化,蒸发除去溶剂,而后进行冷冻真空干燥,以期制备获得纯度较高的大豆苷元产品。首先对大豆异黄酮原料进行碱水解,并利用响应曲面法优化碱水解的条件,结果为:pH 11.0,62min,57℃,葡萄糖苷增长率为296.40%,苷元转化率为8.93%,高压法继续处理,研究碱化-高压对大豆苷元转化的影响,得最优条件:处理时间8min,压力0.2MPa,料液比1:40(g/mL),苷元转化率为71.93%。由此得出碱水解可有效促进乙酰基型、丙二酰基型向葡萄糖苷的转化,获得葡萄糖苷的积累,高压可有效实现葡萄糖苷向苷元的转化,提高苷元转化率。水解糖苷最主要的酶是β-葡萄糖苷酶,但游离型的酶具有不稳定和容易变性的缺点,难以在工业中得到广泛的应用,因此本文采用新兴的纳米氧化铁、氮化铝、二氧化硅材料对β-葡萄糖苷酶进行固定,筛选出纳米二氧化硅为适宜载体,采用对硝基苯酚法测定酶活力,以酶活力回收率为指标考察固定化效果,戊二醛交联剂将β-葡萄糖苷酶固定于二氧化硅,得到最优条件为:温度45℃,pH 5,戊二醛浓度0.5%(w:v),交联时间1h,酶活力回收率71.75%。然后进行重复回收试验,重复使用7次后酶活力基本丧失。4℃条件下进行稳定性实验发现,该固定化酶储存30天后,相对酶活约为70%,是游离酶相对酶活的3.5倍,利用该固定化酶水解大豆异黄酮原料,并优化该水解的工艺参数为:固定化β-葡萄糖苷酶添加量8%,pH 5.0,水解温度55℃,水解100min时,大豆苷元转化率23.37%。以大豆异黄酮粉为原料,相继采用碱化、高压、固定化酶解联合处理,在此条件下酶解液中大豆苷元含量181.75(mg/g),苷元转化率为90.93%。采用大孔树脂对碱化、高压、固定化酶解联合处理后的酶解液进行纯化,通过单因素和响应曲面法优化大孔树脂纯化大豆苷元的最佳工艺条件为:大孔树脂吸附时间、解析时间均为4.2h,大孔树脂与酶解脱色液的比例1:15(w:v),通过冷冻干燥得到大豆苷元产品,其纯度为48.16%,