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我国糖尿病（Diabetic Mellitus.DM）发病率逐年上升。DM最常见的并发症就有糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy,DN）,约占DM的20%～30%,DN同时是导致终末期肾病（End Stage Renal Disease,ESRD）的主要原因之一。DN的发病原因主要有先天遗传因素以及后天生活习惯两大方面,在DN发生过程中,免疫系统、氧化应激、内分泌紊乱、脂肪代谢异常等因素与炎症因子相互作用,导致组织细胞对胰岛素效应的敏感性下降,胰岛素分泌不足,微炎症反应,氧化应激反应等等,造成包括肾小管上皮细胞空泡样变化、小球硬化、滤过膜被破坏等病理变化,导致DN的发生。目前临床上认为在糖尿病发展过程中,会有细胞焦亡（Pyroptosis）的发生,通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡信号通路致使细胞膜的完整性遭到破坏,细胞膜丧失调控物质进出的能力,大量无机小分子进入细胞内,导致细胞膨胀,造成细胞膜溶解、细胞渗透性崩解,大量IL-1β、IL-18被释放至细胞周围的环境中,同时释放出促炎信号影响到周围的细胞,对周围细胞造成影响,募集更多的炎症细胞,最终细胞焦亡就会发生。导师创立“肾痿”学说,认为DN日久,病理产物包括痰湿、热毒、瘀血,搏结于肾脏,肾络受损,气血运行失常,“肾体”受损,肾脏的正常结构被破坏,“肾用”失常。“肾体”和“肾用”两者都受到损伤,肾脏就会发生痿废不用的情况,导致“肾痿”的发生。前期课题组已经从细胞自噬、细胞凋亡等方面研究了糖肾平对糖尿病肾病动物模型的干预作用,对糖肾平调控PI3K/AKT/mTOR、Wnt/β-actin、Notch/snail、RhoA/ROCK 等信号通路进行研究;临床研究显示,糖肾平治疗30例DN患者,总有效率达93.33%,在改善临床表现、实验室指标以及中医证候积分方面具有良好的效果。本研究采用高脂饲料+小剂量链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）建立的DN大鼠模型做为研究对象,更符合2型DM引发DN的过程,高糖高脂饲料喂养致使胰岛素抵抗出现,STZ破坏胰岛β细胞,致使胰岛素分泌不足;使用Western blotting、原位杂交、免疫组化、HE染色、Mallory染色、透射电镜、RT-PCR及Real Time PCR等方法技术,探讨糖肾平对DN大鼠肾脏的保护作用以及调控NLRP3/Caspase1/GSDMD焦亡信号通路关键分子的影响,为“肾痿”学说提供依据。目的:采用高脂饲料+小剂量STZ建立符合2型DM的DN大鼠动物模型,观察糖肾平对DN大鼠体内药效学、氧化应激水平的影响,应用HE与Mallory染色、透射电镜观察DN大鼠的肾脏组织病理形态;应用RT-PCR、免疫组化、原位杂交、Western blotting技术检测肾脏组织中GSDMD、NLRP3、IL-1β、Caspase-1及IL-18蛋白及mRNA的表达,研究糖肾平对DN大鼠肾脏的保护作用以及对NLRP3/Caspase1/GSDMD焦亡信号通路的影响,为“肾痿”学说提供依据。方法:1.SPF级SD雄性大鼠42只,体重200±20g。SD大鼠于洁净动物橱中喂养,自由饮水进食,适应性喂养7天后,按体重分层进行分组,正常组7只,造模组35只。造模组喂养高糖高脂饲料,正常组普通饲料喂养。饲养环境为室温（23±2）℃,相对湿度为（55±10）%,每天12小时光照,昼夜交替循环。2.高糖高脂饲料喂养8周后,造模组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素（35mg/kg）,48h后对其尾静脉血进行血糖测试,成模标准:随机血糖≥16.7mmol/L,且尿糖试纸检测尿糖（++++）。模型成功的动物继续喂养高糖高脂饲料,正常组动物喂养普通饲料。3.成模动物,依照体重区段随机分为:模型组、厄贝沙坦组、糖肾平小剂量组、中剂量组、大剂量组。糖肾平各剂量组按照患者临床用药剂量给与用药,分别为小剂量为临床的3.5倍（0.525g/kg·d-1）、中剂量为临床的7倍（1.05g/kg·d-1）、大剂量为临床的14倍（2.1g/kg·d-1）,厄贝沙坦为临床患者用药剂量的10倍（25mg/kg·d-1）。4.所有用药组灌胃给药,正常组与模型组动物为等体积的去离子水进行灌胃,按照体重系数0.lmL/100g/day,计算灌胃剂量。以上各组动物按组分笼饲养,模型组及用药组动物继续高糖高脂饲料喂养,不限制进食饮水。每日更换垫料,用药15周后取材。5.观察各组大鼠的一般状况,包括体重、精神情况、活动、外表皮毛发泽等情况,血清检测血脂、氧化应激、炎症指标,24h尿检测尿蛋白定量变化。动物肾组织包埋切片进行HE以及Mallory染色、电镜观察糖肾平对糖尿病肾病动物肾组织病理改变的影响,并进一步应用免疫组化、原位杂交、RT-PCR、Western blotting 方法观察肾脏组织中 Caspase-1、NLRP3、GSDMD、IL-1β、IL-18的变化情况。结果:1.糖肾平对DN大鼠作用:相较于模型组,糖肾平小、中、大剂量组的动物一般状态有了明显的改善、体质量有不同程度的增加,给药15周后糖肾平中、大剂量组大鼠体质量明显增加（P<0.01）,肾重体重比值降低明显（P<0.01）,24h尿蛋白定量减少明显（P<0.01）,血清UREA水平明显降低（P<0.01）,TG、Scr水平降低（P<0.05）,肾脏病理有所改善。糖肾平大剂量组肾小球基底膜厚度减少明显（P<0.01）,与模型组比较,糖肾平各用药组的氧化应激指标改善,NO、SOD含量提升（P<0.01）,ROS含量降低（P<0.01）。2.糖肾平对高脂饲料联合小剂量STZ诱导的DN动物模型肾组织中NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号转导通路重要指标的影响:相较于模型组,糖肾平各用药组中 Caspase-1、NLRP3、GSDMD、IL-1β、IL-18 蛋白与 mRNA的水平明显降低,糖肾平大剂量治疗干预效果更好。结论:1.糖肾平可改善DN大鼠的症状,改善大鼠的氧化应激状态,减轻大鼠的肾损伤,降低大鼠的尿蛋白,保护肾脏功能,延缓糖尿病肾病的微炎症状态及细胞焦亡的进程,且其疗效呈剂量依赖性。2.糖肾平可以降低DN大鼠血清中IL-1β、IL-18的水平,从而抑制DN大鼠体内的微炎症状态,延缓细胞焦亡的进程。3.糖肾平可以通过调控DN大鼠肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路上各个关键分子蛋白及mRNA的表达量,抑制细胞焦亡的发生、炎症反应的进一步发展。