头穴丛刺对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力及海马TH表达的影响

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wearetian
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目的:通过酒精灌胃的方法,建立慢性酒精性中毒大鼠的模型,运用Morris圆形水迷宫、免疫组化等方法及手段观察头穴丛刺对慢性酒精中毒大鼠的学习记忆能力及相关蛋白酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响,从不同的层面探讨头穴丛刺对于慢性酒精性中毒的治疗的作用机制,发挥针灸的治疗作用,以便更好的指导临床治疗工作。方法:将大鼠进行Morris水迷宫实验后,淘汰游泳能力差的大鼠,将游泳能力正常的大鼠100只随机分为空白对照组25只,灌胃组75只。灌胃组酒精灌胃6周后将存活60只(灌胃期间死亡15只)大鼠随机分为头穴丛刺组、模型组和多奈哌齐组,每组各20只,将4组大鼠再次进行Morris水迷宫实验。头穴丛刺组:取大鼠的百会及其左右旁开2mm处三个腧穴,留针30 min,每円1次,连续治疗4周。多奈哌齐组:多奈哌齐灌胃治疗,将盐酸多奈脈齐溶于0.5%羧甲基纤维素钠溶液中,给予大鼠0.05mg/kg灌胃治疗,每天1次,与头穴丛刺组同一时段进行,连续治疗4周。空白对照组、模型组:对大鼠进行抓取捆绑处理,每円一次,每次30min,共4周。治疗4周后,采用Morris水迷宫检测慢性酒精中毒模型大鼠空间学习能力。HE染色法观察慢性酒精中毒模型大鼠海马CA1区细胞形态的改变。应用免疫组化法观察慢性酒精中毒模型大鼠海马区 TH表达的影响。采用spss1 7.0统计软件包分析实验数据,P<0.05具有统计学意义。结果:1.Morris水迷宫检测结果:学习能力方面:造模前,四组大鼠逃避潜伏期组间比较,P>0.05,差异无统计学意义。造模6周后,头穴丛刺组、模型组、多奈哌齐组大鼠逃避潜伏期均明显延长,时间长于空白对照组,P<0.01,差异具有统计学意义。治疗4周后,多奈哌齐组、头穴丛刺组逃避潜伏期均缩短,时间短于模型组,具有统计学意义(P<0.01);头穴丛刺组与多奈哌齐组逃避潜伏期相当,不具有统计学意义(P>0.05)。记忆能力方面:造模前,四组大鼠第Ⅲ象限的停留时间组间比较,P>0.05,差异无统计学意义。造模6周后,头穴丛刺组、模型组、多奈哌齐组大鼠第Ⅲ象限的停留时间均明显延长,时间长于空白对照组,P<0.01,差异具有统计学意义。治疗4周后,多奈哌齐组、头穴丛刺组第Ⅲ象限的停留时间均缩短,时间短于模型组,具有统计学意义(P<0.01);头穴丛刺组与多奈哌齐组第Ⅲ象限的停留时间相当,不具有统计学意义(P>0.05)。2.HE染色结果:空白对照组:细胞结构完整,轮廓清晰,未发现明显病理改变。模型组:可见大部分神经元细胞排列紊乱稀疏明显固缩,胞体形态各异,胞浆浓缩,颜色深染且不均匀,核仁缩小,甚至消失,神经元细胞周边出现空壳区域。头穴丛刺组:可见神经细胞排列较整齐,细胞形态规则、清晰,胞质染色均匀色浅,少见轻度固缩锥体细胞,核仁清晰,可见空壳区。多奈哌齐组:神经细胞排列略紊乱,形态较清晰,细胞形态尚规则,细胞边缘清晰,多数神经细胞核清晰,少见固缩椎体细胞,相比于头穴丛刺组略多且明显。3.TH表达结果:头穴丛刺组、多奈哌齐组和模型组可见TH表达均较空白对照组上调,相比于空白对照组,P<0.05,差异具有统计学意义;头穴丛刺组和多奈哌齐组TH表达高于模型组,P<0.05,差异具有统计学意义;头穴丛刺组TH表达高于多奈哌齐组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.头穴丛刺法可以改善慢性酒精中毒大鼠的学习记忆能力,其疗效与多奈哌齐组治疗效果相当。2.头穴丛刺法可以使慢性酒精中毒大鼠海马酪氨酸羟化酶(TH)的表达上调,并优于多奈哌齐。
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