【摘 要】
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【目的】通过生物信息学方法预测lncRNA-microRNA-mRNA在结直肠癌中有潜在的调节靶点,理论上可在结直肠癌中通过体外细胞实验建立三者之间存在调控关系。但是目前LINC00460-miR143-COL1A1的调控通路在结直肠癌中的调控机制尚不清楚。因此,本实验拟探究该网络调控之间的作用关系以及对结直肠癌细胞增殖和转移的作用。【方法】1.细胞培养:从中国科学院上海细胞库购的三株结直肠癌细胞
【基金项目】
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舒武英主治医师,云南省科技厅地方高校联合专项课题-面上项目:Linc00460-miR143-COL1A1表达调控网络在结直肠癌细胞增殖和转移的作用机制研究（2019010070147）；
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【目的】通过生物信息学方法预测lncRNA-microRNA-mRNA在结直肠癌中有潜在的调节靶点,理论上可在结直肠癌中通过体外细胞实验建立三者之间存在调控关系。但是目前LINC00460-miR143-COL1A1的调控通路在结直肠癌中的调控机制尚不清楚。因此,本实验拟探究该网络调控之间的作用关系以及对结直肠癌细胞增殖和转移的作用。【方法】1.细胞培养:从中国科学院上海细胞库购的三株结直肠癌细胞HCT-8、HT-29、SW480,正常结肠上皮细胞NCM460,并对其进行培养。2.进行体外细胞实验,采用慢病毒感染技术降低HCT-8、HT-29、SW480三组结直肠癌细胞内的LINC00460表达。过表达NCM460细胞内的LINC00460基因。3.通过qPCR技术测定LINC00460得下游miR-143、COL1A1基因表达高低。4.对细胞进行CCK8、划痕实验和侵袭实验,观察结直肠细胞的增殖、迁移、侵袭能【结果】1、LINC00460在结直肠癌细胞HCT-8、HT-29、SW480中呈高表达,在正常结肠上皮细胞NCM460呈低表达（P＜0.05）。实验组对比对照组,结直肠细胞系得增殖、迁移能力、侵袭情况存在明显差异性。2、miR143在结直肠癌细胞HCT-8、HT-29、SW480中呈低表达,在正常结肠上皮细胞NCM460呈高表达（P＜0.05）。与细胞的增殖、迁移和侵袭能力负相关。3、COL1A1在结直肠癌细胞HCT-8、HT-29、SW480呈高表达,在正常结肠上皮细胞NCM460呈低表达（P＜0.05）。与细胞的增殖、迁移和侵袭能力正相关。4、LINC00460、miR143、COL1A1在结直肠癌中具有调控关系,在正常结肠上皮细胞NCM460上调LINC00460表达,miR143的表达降低,COL1A1的表达增加。在结直肠癌细胞HCT-8、HT-29、SW480中下调LINC00460,MIR143的表达升高,COL1A1的表达下降。【结论】1、LINC00460的高表达可促进结直肠癌细胞得增殖能力、迁移能力和侵袭能力;2、LINC00460可在体外实验中调控miR143与COL1A1的表达,影响结直肠癌细胞的生长、侵袭和转移。
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