HLJ1在结直肠癌中的表达及其临床生物学意义

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目的:人肝脏DnaJ-like蛋白(HLJ1)是热休克蛋白40分子伴侣家族的成员之一,HLJ1在非小细胞肺癌(NSCLC)和肝细胞癌(HCC)中的作用已经有学者证实,而其在结直肠癌(CRC)中的意义目前尚不明确。本文旨在检测HLJ1基因及HLJ1蛋白在CRC细胞株中的表达,测定HLJ1蛋白在CRC癌组织、癌旁正常黏膜组织及淋巴结组织中的表达,分析HLJ1水平与CRC患者各临床病理特征间的联系,比较不同HLJ1表达水平患者的存活率差异,从而探讨HLJ1在结直肠癌中的临床生物学意义。方法:采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)两种方法分别检测5种低转移性结直肠癌细胞株和2种高转移性结直肠癌细胞株中HLJ1基因及蛋白表达;免疫组织化学(IHC)方法检测147例CRC患者手术标本的癌组织、癌旁正常黏膜组织及相应淋巴结组织中HLJ1表达;分析HLJ1表达与CRC患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、浆膜浸润、淋巴结转移、淋巴结转移率(LNR)、Dukes’分期及远处转移相应临床病理特征联系;采用生存曲线分析比较不同HLJ1表达水平的结直肠癌患者生存率差异。结果:实时RT-PCR结果显示低转移性结直肠癌细胞株与高转移性结直肠癌细胞株相比,HLJ1基因表达上调,且表达增高四倍,Western blot检测各细胞株的HLJ1蛋白水平显示出同样结果:低转移性结直肠癌细胞株HLJ1蛋白水平明显高于高转移性细胞株;147例CRC患者癌组织或者淋巴结转移性癌组织的HLJ1表达较癌旁正常粘膜明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),并且HLJ1表达在结直肠癌组织中伴淋巴结转移者较无淋巴结转移者相比显著降低(P<0.01),然而伴淋巴结转移的CRC癌组织HLJ1表达与转移性淋巴结组织之间没有显著差异(P>0.05);另外分析HLJ1表达与CRC患者各临床病理特征联系显示HLJ1表达与淋巴结转移、Dukes’分期及远处转移密切相关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、浆膜浸润、淋巴结转移率之间未显示相关性;此外,Kaplan-Meier生存曲线结果表明HLJ1高水平的CRC患者远期生存率显著高于HLJ1低水平者(P<0.05),单一危险因素分析,HLJ1的表达、肿瘤分级、淋巴结转移、淋巴结转移率、Dukes’分期和远处转移与CRC预后显著相关(P<0.05),多因素风险分析结果表明HLJ1的表达与淋巴转移可能在预测CRC患者的总生存期中发挥作用(P<0.05)。结论:HLJ1是一个强有力的结直肠癌抑制基因,HLJ1不仅在体外培养转移潜能不同的CRC细胞株时显示出差异性表达,HLJ1蛋白也在CRC患者癌组织或转移性淋巴结组织中表达降低;更值得提出的是HLJ1表达与CRC患者临床病理特征显示出一定的相关性及HLJ1高水平CRC患者生存率明显高于HLJ1低水平者。由此,HLJ1可能参与CRC增殖、发展、侵袭,其表达下调可作为预测CRC患者临床转归的生物标记物。
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