尿液miR-106B-25基因簇在膀胱癌中的诊断应用价值

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目的:  本研究旨在通过检测miR-106b-25基因簇在膀胱癌患者离心尿液上清中的表达,评估其作为膀胱癌无创诊断分子标志物的价值。  方法:  本研究分为三个步骤:(1)收集20例膀胱癌患者和20例对照组尿液,荧光定量RT-PCR检测miR-106b-25簇中三种miRNAs的表达,筛选出差异目的miRNA。(2)荧光定量RT-PCR验证miR-106b-25簇中筛选出的差异miRNA在112例膀胱癌患者和78例对照组尿液中表达,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析差异目的miRNA对膀胱癌的早期诊断价值。(3)荧光定量RT-PCR检测差异目的miRNA在20例配对的膀胱癌患者术前和术后14日尿液中的表达,评估差异目的miRNA在膀胱癌疗效监测中的应用价值。  结果:  (1)膀胱癌患者尿液miR-106b表达显著高于健康对照组(P<0.001),而miR-93和miR-25表达则无显著差异(miR-93,P=0.645; miR-25,P=0.281),确定miR-106b为表达差异的目的miRNA。  (2)验证试验表明miR-106b在膀胱癌尿液中表达显著高于健康对照组(P<0.001)。鉴于miR-106b在膀胱癌尿液中的高表达水平,我们进一步评估了尿液miR-106b的表达与膀胱癌患者临床病理参数间的关系。尿液中miR-106b表达水平与膀胱癌浸润程度显著相关,浸润性膀胱癌患者尿液中miR-106b表达水平显著高于非浸润性膀胱癌患者(P=0.006)。尿液中miR-106b表达水平与膀胱癌患者年龄、性别、肿瘤分化程度以及局部淋巴结转移则没有显著关系。尿液中miR-106b表达水平诊断膀胱癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.802(95% CI:0.753-0.872)。当以0.975为诊断最佳临界值,尿液中miR-106b对膀胱癌的诊断敏感度和特异度分别为76.8%和72.4%,  (3)膀胱癌术后尿液miR-106b表达水平较术前显著降低(P=0.007)。一例膀胱癌复发患者尿液miR-106b表达水平则复而上升。  结论:  (1)MiR-106b-25基因簇成员miR-106b水平在膀胱癌患者尿液中高表达,且术后表达下降,可能是潜在的膀胱癌早期诊断与疗效监测的分子标志物。  (2)尿液miR-106b水平与膀胱癌患者浸润程度显著相关,提示miR-106b可能参与了膀胱癌的肿瘤浸润病理过程,在膀胱癌的发生与发展进程中具有重要作用。
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