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目的： Smad核转录共抑制因子(SnoN)作为一种拮抗剂可调控转化生长因子-β1/Smad(TGF-β1/Smad)信号的活性，从而保证在正常生理条件下TGF-β1/Smad信号输出的稳定性。目前已有研究表明SnoN蛋白可以拮抗TGF-β1所致的肾纤维化作用。而在肝纤维化进展中，SnoN蛋白是否具有同样的作用，尚未见报告，本文通过观察SnoN蛋白、TGF-β1、Smurf2等在大鼠肝纤维化进展中的动态表达变化，研究其与肝纤维化发生发展的关系。 方法： 本课题采用二甲基亚硝铵（DMN）腹腔注射的方法制备大鼠肝纤维化模型，用同周龄的SD大鼠作为空白对照。在造模第2，4，6，8周末处死大鼠，动态观察大鼠肝脏内SnoN、Smurf2、TGF-β1及COL-Ⅰ的含量变化，HE染色和MASSON氏三色染色进行肝脏病理学检查。 结果： 1.各实验组肝脏组织病理学变化 1.1形态学观察 末期处理剖取大鼠肝脏前，先对试验动物肝脏进行大体观察，观察结果发现正常2、4、6、8周组大鼠肝脏颜色深红，表面光滑，质地较软。模型2、4、6、8周组大鼠肝脏均较同龄空白组增大，颜色变浅，多为灰黄色。 1.2组织HE染色结果 正常对照2、4、6、8周组大鼠肝小叶结构清楚完整，肝细胞以中央静脉为中心向周围呈放射状排列，肝窦清晰可见，小叶间无纤维增生，仅汇管区和中央静脉血管壁有少量纤维组织，汇管区小叶间动脉、静脉和小叶间胆管未见扩张、增生，未见肝细胞变性、坏死。与同龄空白组相比，模型2周组大鼠肝细胞肿胀，排列尚整齐，胞浆疏松，细胞核位于中央，肝窦狭窄，为肝细胞水泡变性，肝小叶周围纤维组织增生，血管稍扩张。模型4周组大鼠肝细胞浊肿，肝窦间可见少量红细胞淤积，肝小叶周围纤维组织明显增生。模型6周组大鼠肝细胞浊肿，散见大泡性或小泡性脂肪变性，汇管区淋巴细胞核单核细胞浸润，汇管区出现明显纤维增生。模型8周组大鼠肝细胞出现脂肪变性，汇管区增宽，出现大量淋巴细胞、单核细胞浸润，肝小叶周围及肝细胞间纤维组织增生，形成粗大纤维网格，包绕肝细胞团块。HE染色实验结果提示，本课题中的大鼠肝纤维化模型制作成功，模型组大鼠肝纤维化程度随着时间的推移逐渐加重。 1.3组织MASSON氏三色染色结果 正常对照2周组大鼠肝脏内未见明显胶原纤维沉积和胶原网络，仅汇管区和中央静脉血管壁有少量胶原纤维。与空白组相比，模型2周组大鼠肝脏内血管周围可见蓝色胶原纤维，纤维较细且短，未见胶原网格，即轻度纤维化。模型4周组大鼠肝脏内汇管区和血管周围胶原纤维增多尤为明显。模型6周组大鼠肝脏内可见较多粗而长的蓝色胶原纤维伸入肝小叶。模型8周组大鼠肝组织胶原纤维明显增多，呈放射状向肝实质延伸，相互连接成纤维网格。MASSON染色结果提示，模型组大鼠肝脏内胶原纤维沉积进行性加重。 2.肝组织SnoN、Smurf2、TGF-β1和COL-ⅠmRNA动态表达结果 由实验结果可知，与空白2周组比，模型组大鼠肝脏TGF-β1和COL-Ⅰ的表达水平呈逐步增高趋势，在第6周时均稍有降低;Smurf2的表达水平在第2-6周呈增高趋势，第8周急剧下降，与空白组相比均具有显著差别，差别具有统计学意义(P＜0.05或0.01)。SnoN表达呈逐步降低趋势，从4周以后模型组与对照组相比均具有显著差别，差别具有统计学意义(P＜0.05或0.01)。 3.各试验组大鼠肝功能结果 实验结果提示，空白2、4、6、8周动物肝脏内谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)的含量稳定，未见明显变化。与空白组相比，DMN造模后大鼠肝脏内ALT、AST和TBil含量明显升高，ALB的含量明显降低，与同龄空白组相比具有明显的差别，差别具有统计学意义(P＜0.05或0.01)，实验结果表明模型组大鼠造模2周后肝功能已经开始出现明显异常，一直持续至第8周。 模型组第4、6、8周肝纤维化明显;血清ALT、AGT、Tbil升高，4周时达高峰;Alb逐步下降，6周时最低，各时间点与同龄对照组比较均有统计学差异(P＜0.01或P＜0.005)。模型组大鼠肝组织内SnoN表达进行性降低，第8周达到最低;Smurf2表达量逐渐增加，在第6达最高峰，且明显高于对照组，在第8周时急剧下降; TGF-β1表达水平逐步增高，在第6周时略低于第4周和第8周，各模型组与同龄对照组相比均具有统计学差异(P＜0.01或P＜0.05)。 结论： 1.SnoN蛋白随造模时间的延长明显减少，而TGF-β1则随造模时间的延长逐渐增多，表明肝脏中TGF-β1的表达与SnoN蛋白的表达可能存在负性调节关系，即SnoN表达减少，则TGF-β1表达增多。 2.在肝纤维化的形成的过程中， SnoN、Smurf2与Smad系列蛋白三者之间可能存在着某种失调，促使TGF-β1表达增加，从而激活HSC并最终导致肝纤维化的形成。