论文部分内容阅读
目的:卵巢癌是女性生殖系统常见三大恶性肿瘤之一,也是妇科第二常见的、死亡率最高的恶性肿瘤,紫杉醇作为一线用药在卵巢癌治疗中起到了重要作用,但紫杉醇耐药也是目前不得不应对的问题,有研究表示 TLR/MyD88信号通路在卵巢癌细胞紫杉醇耐药方面起到重要作用,因此本实验以人卵巢癌细胞 MyD88+细胞 SKOV-3和MyD88-细胞 A2780进行研究为研究对象,研究具有抗肿瘤作用的白术提取物—白术内酯Ⅰ对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞IL-6、VEGF、Survivin表达的拮抗作用,探讨其与卵巢癌紫杉醇耐药及其预后的关系,以期为临床治疗及预后判断提供新的理论依据,同时寻找新的靶向治疗途径。 方法:分别用紫杉醇、脂多糖、白术内酯Ⅰ单独或两两联合诱导人卵巢癌细胞MyD88+细胞SKOV-3和MyD88-细胞A2780,应用蛋白质印迹法分别检测IL-6、Survivin和VEGF三种蛋白在人卵巢癌细胞SKOV-3、A2780中的表达情况;运用统计软件SPSS16.0对数据进行统计学分析。 结果:1、TLR-4/MyD88+人卵巢癌细胞SKOV-3细胞内能自分泌IL-6外,LPS和紫杉醇均可以剂量依赖和时间依赖的方式促进其细胞内IL-6的生成,白术内酯Ⅰ单独和联合LPS或紫杉醇呈浓度依赖性降低IL-6的分泌。TLR-4/MyD88-人卵巢癌细胞A2780细胞内几乎不生成IL-6,LPS、紫杉醇和白术内酯Ⅰ均不能影响IL-6的表达。 2、TLR-4/MyD88+人卵巢癌细胞和TLR-4/MyD88-的人卵巢癌细胞自身均表达VEGF,LPS对SKOV-3细胞内VEGF的分泌呈浓度依赖性和时间依赖性,但LPS浓度分别为0.1μg/ml和1μg/ml时对SKOV-3细胞内分泌 VEGF的影响,两者无明显区别(P>0.05);PTX对SKOV-3细胞内VEGF的分泌呈浓度依赖性和时间依赖性,但紫杉醇浓度在0.001μmol/L时,SKOV-3细胞内分泌的VEGF变化不大,无统计学意义(P>0.05),在0.01～0.1μmol/L范围内是,随浓度的增加,SKOV-3细胞内分泌的VEGF降低,有统计学意义(P<0.05),这可能与高浓度的紫杉醇促凋亡和细胞杀伤作用有关;白术内酯Ⅰ单独和联合 LPS或紫杉醇均能呈浓度依赖性降低 VEGF的分泌。而在A2780细胞内,LPS、紫杉醇和白术内酯Ⅰ均不能影响VEGF的表达。 3、SKOV-3人卵巢癌细胞和A2780人卵巢癌细胞均可自分泌Survivin;LPS和紫杉醇促进 SKOV-3细胞内Survivin分泌并呈浓度依赖性和时间依赖性;白术内酯Ⅰ不能降低Survivin的分泌,但联合LPS或紫杉醇均能呈浓度依赖性降低 Survivin的分泌。而在 A2780细胞内,LPS、紫杉醇和白术内酯Ⅰ均不能影响Survivin的表达。 结论:白术内酯Ⅰ具有抗炎、抗肿瘤、促凋亡作用,通过 TLR-4/MyD88依赖方式拮抗紫杉醇诱导卵巢癌分泌 IL-6、VEGF、Survivin,提高紫杉醇敏感性。