目的:基于酶联免疫吸附试验探讨环境因素(主要包括汽车尾气和吸烟)对体液免疫可能造成的影响;通过高效液相色谱-质谱串联仪探究汽车尾气和香烟烟雾-水溶液的成分。问卷调查收集吸烟者和非吸烟者样本,对其汽车尾气抗体、烟液抗体、吸入性和食物性过敏原、抗核抗体等进行检测,进而探究汽车尾气抗体和烟液抗体与自身抗体之间的关联;随机选取慢性阻塞性肺病、肺癌及健康体检人群进行汽车尾气抗体和烟液抗体检测,并在分子水平上研究HLA-DQB1基因携带差异与抗体之间的关联。方法:1.旅顺口区人民医院体检中心问卷调查吸烟者和非吸烟者各24名男性受试者,吸烟者平均年龄40.08±10.80岁;非吸烟者平均年龄为33.63±11.40岁。通过液体碰撞法制备汽车尾气和香烟烟雾-水溶液,包被汽车尾气、烟液抗原酶联板,通过酶联免疫吸附试验检测样本中汽车尾气、烟液IgG抗体。2.选取昆明小鼠(6周龄,20 g左右)作为动物实验研究汽车尾气和烟液相关物质的抗原性,采用腹腔注射方法多次注射汽车尾气、烟液抗原,三次免疫后,采动物全血、血清分离,进行汽车尾气、烟液IgG抗体检测。3.通过免疫印迹法检测吸烟者血清中抗核抗体及吸入性和食物性过敏原特异性抗体,研究吸烟与自身抗体之间是否存在联系。4.通过高效液相色谱-质谱串联仪对1支、10支、20支香烟通过液体碰撞法所产生的香烟烟雾-水溶液进行成分分析。5.通过胶体金免疫层析法定性检测吸烟者和非吸烟者各24名男性受试者血清中的可替宁,用生理盐水对血清进行10倍和100倍稀释,对受试者血清中可替宁程度进行初步分级。6.85例大连医科大学附属二院检验科受试者,包括肺癌患者30例(平均年龄71.90±4.21),COPD患者25例(平均年龄71.52±10.00),健康体检者30例(平均年龄72.17±8.15),分离其全血及血清。对其血清进行汽车尾气、烟液IgG抗体检测;同时采用PCR扩增技术检测85例受试者全血中HLA-DQB1等位基因的频率分布,进而分析HLA-DQB1基因多态性与IgG抗体之间的关联。结果:1.通过酶联免疫吸附试验,发现人血清中存在汽车尾气IgG抗体和烟液IgG抗体(p<0.01),而且两种抗体间存在显著相关性(r=0.321;p=0.026(p<0.05))。2.通过酶联免疫吸附试验,发现吸烟者与非吸烟者;肺癌、慢性阻塞性肺病患者及健康体检者汽车尾气IgG抗体和烟液IgG抗体检测,受试者之间不存在统计学差异。3.通过高效液相色谱-质谱串联仪对香烟烟雾-水溶液成分分析,确定香烟烟雾-水溶液成分中含有大量生物烟碱类物质,主要包括尼古丁、可替宁、假木贼碱、降烟碱、新烟草碱。4.通过胶体金免疫层析法对48名受试者血清中可替宁定性检测,24名非吸烟者结果判读均为阴性,24名吸烟者结果判读均为阳性。24名吸烟者血清进行生理盐水10倍稀释后,有10名出现阴性,吸烟者血清进行生理盐水100倍稀释,结果判读均呈阴性。5.汽车尾气、烟液IgG抗体的高低与HLA-DQB1基因多态性、抗核抗体及吸入性和食物性过敏原特异性抗体不存在显著相关性。结论:1.血清中可能存在抗汽车尾气和香烟烟雾-水溶液相关抗原的IgG抗体。2.汽车尾气和烟液IgG抗体对机体体液免疫的影响可能呈特异性。3.汽车尾气和烟液IgG抗体的高低与HLA-DQB1基因多态性不存在统计学关系,与肺癌和COPD发病无关,其对体液免疫的影响和致病可能存在特殊机制。