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目的胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发恶性肿瘤。尽管在手术、化疗和放疗等方面取得重大进展,但恶性胶质瘤患者的预后效果仍不理想。胶质瘤是典型的血管依赖性实体肿瘤,其生长主要依赖于肿瘤血管生成。因此,如何抑制胶质瘤血管新生是胶质瘤分子靶向治疗的热点,受到国内外学者的广泛关注。微小RNA(MicroRNA,miRNA)是一类长度为22~24个核苷酸的非编码内源性小RNA,主要通过与其下游靶基因的mRNA 3’非翻译区(3’untranslated regions,3’UTR)靶向结合,降解mRNA或抑制mRNA翻译来发挥调控作用。研究表明,多种差异表达的miRNA参与胶质瘤的血管新生,发挥抑癌或促癌作用。MiR-411是14q32.31 miRNA基因簇的成员。该基因簇多个成员在新生血管中发挥重要作用。但miR-411是否参与调控胶质瘤血管新生目前还不清楚。有研究报道,miR-411在胶质瘤组织和细胞中的表达显著下调,并参与进化保守的非编码RNA对胶质瘤细胞增殖的调控,提示它可能是潜在的抑癌基因。然而,miR-411在胶质瘤微血管内皮细胞(glioma-exposed microvascular endothelial cells,GECs)中的表达尚不明确。miR-411能否通过抑制胶质瘤微血管内皮细胞的迁移和管形成进而抑制胶质瘤血管新生,发挥抑癌作用,目前尚未见报道。G补缀FHA域血管生成因子1(angiogenic factor with G patch and FHA domains1,AGGF1)是在研究人类先天性静脉肢体肥大综合征(Klippel-Trenaunay Syndrome,KTS)时新发现的一种血管生成相关因子。AGGF1在血管内皮细胞中高表达,参与介导内皮细胞增殖、迁移、管形成和以主动脉环为中心的血管生成。前期研究显示AGGF1参与调控胶质瘤血管新生。但是关于AGGF1是否参与miR-411对胶质瘤微血管内皮细胞迁移和管形成的影响,进而调控血管新生,目前还不清楚。本研究首先明确miR-411-5p在胶质瘤微血管内皮细胞中的表达水平,进一步研究miR-411-5p对胶质瘤微血管内皮细胞迁移和管形成能力的影响,最后探讨miR-411-5p是否通过靶向结合AGGF1影响胶质瘤血管新生,为胶质瘤的抗血管新生治疗提供新的靶标。方法实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检测miR-411-5p在胶质瘤微血管内皮细胞中的表达水平。分别转染miR-411-5p agomir或antagomir过表达或表达沉默miR-411-5p,qRT-PCR验证其转染效率;并用划痕实验、Transwell小室迁移实验和Matrigel胶体外血管形成实验分别检测胶质瘤微血管内皮细胞的迁移能力和体外管形成能力变化,研究其在胶质瘤血管新生中的作用。分别构建野生型和突变型AGGF1 3’UTR报告基因质粒,分别与miR-411-5p agomir共转染293T细胞,双荧光素酶报告基因系统分析miR-411-5p与AGGF1的靶向结合。qRT-PCR和western blot方法检测过表达或表达沉默miR-411-5p后AGGF1 mRNA和蛋白的表达水平变化。结果miR-411-5p在胶质瘤微血管内皮细胞中的表达显著低于正常脑微血管内皮中的表达(P<0.05 vs.ECs group)。在转染miR-411-5p agomir的细胞中,miR-411-5p的表达水平显著上调(P<0.01 vs.miR-411-5p agomir NC group);在转染miR-411-5p antagomir的细胞中,miR-411-5p的表达水平并未显著下调(P>0.05 vs.miR-411-5p antagomir NC group)。过表达miR-411-5p显著抑制胶质瘤微血管内皮细胞的迁移(P<0.05或P<0.01 vs.miR-411-5p agomir NC group)和管形成能力(P<0.01 vs.miR-411-5p agomir NC group);表达沉默miR-411-5p显著促进胶质瘤微血管内皮细胞的迁移(P<0.05或P<0.01vs.miR-411-5p antagomir NC group)和管形成能力(P<0.01和P<0.05 vs.miR-411-5p antagomir NC group)。miR-411-5p与AGGF1存在靶向结合作用(P<0.05 vs.AGGF1-wt+miR-411-5p NC group)。过表达miR-411-5p显著下调AGGF1 mRNA(P<0.05 vs.miR-411-5p agomir NC group)和蛋白(P<0.01 vs.miR-411-5p agomir NC group)的表达水平;表达沉默miR-411-5p显著上调AGGF1 mRNA(P<0.01 vs.miR-411-5p antagomir NC group)和蛋白(P<0.01 vs.miR-411-5p antagomir NC group)的表达水平。结论1.miR-411-5p在胶质瘤微血管内皮细胞中低表达。2.过表达miR-411-5p抑制胶质瘤微血管内皮细胞的迁移和管形成能力,表达沉默miR-411-5p促进胶质瘤微血管内皮细胞的迁移和管形成能力。3.miR-411-5p靶向结合AGGF1并下调其表达水平,可能是miR-411-5p抑制胶质瘤血管新生的机制。