人参皂苷是人参中的主要活性成分,在抗菌、抗炎、降血压、降血脂、提高机体免疫力以及改善中枢神经系统等方面具有十分显著的生理活性,尤其是稀有人参皂苷在抗肿瘤方面的活性要优于常量人参皂苷。生物酶法转化常量人参皂苷制备稀有人参皂苷高效、选择性好,而固定化酶技术可以解决游离酶难以回收再利用的问题,酶经过载体的固定化后,具有更优越的特点如稳定性增强、选择性更高、耐高温、耐酸碱等特点。本论文主要研究以氨基色谱固定相和功能化磁性Fe₃O₄粉体作为载体固定化β-葡萄糖苷酶,用于转化人参皂苷Rb1。论文建立亲水作用色谱法用于快速、同时测定14种人参皂苷。采用UG80-CAPCELL PAK SCX（4.6 mm I.D.×250 mm,5μm）色谱柱作为固定相,人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rf、Re、Rg1、Rg2、Rg3、Rh1、Rh2、F2、C-K可以得到快速、良好的分离,方法准确度高,重现性好。HILIC模式分析人参皂苷结果表明人参皂苷的分子量、极性、容量因子两两正相关。通过三种分别来源于黑曲霉、苦杏仁以及本实验室提取的β-葡萄糖苷酶对人参皂苷Rb1的转化路径进行了探究,并以氨基硅胶色谱填料作为载体固定化β-葡萄糖苷酶用于转化人参皂苷Rb1,考察了酶最佳反应温度、最适p H值、热稳定性、耐酸碱性以及稳定性,研究了酶在固定化前后的酶学性质。结果表明,游离酶与固定化酶的最佳p H相同,均为5.5,游离酶的最佳反应温度为40℃,固定化酶的最佳反应温度为45℃;酶固定化前后的米氏常数Km分别为0.503mmol·L^-1、0.360 mmol·L^-1。固定化的酶重复使用40次后,酶活为原来的56.4%。以磁性Fe₃O₄粉体作为原材料,用3-氨基丙基三乙氧基硅烷对其进行修饰,对所得材料进行了表征。采用生物素-链霉亲和素法固定化β-葡糖糖苷酶。考察了酶最佳反应温度、最适p H值、热稳定性、耐酸碱性以及稳定性,研究了酶在固定化前后的酶学性质。结果表明,游离酶与固定化酶的最佳温度相同,均为40℃,游离酶的最佳p H为5.5,固定化酶的最佳p H为6.0;酶固定化前后的米氏常数Km分别为0.503 mmol·L^-1、0.064 mmol·L^-1。通过本方法固定化的酶重复使用25次后,酶活为原来的50.9%。通过生物素-链霉亲和素法固定化酶,其稳定性大幅度提高,在实际应用当中具有广阔的前景。