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目的：Notch信号通路在肿瘤扮演癌基因或抑癌基因作用，但其在肝癌中的作用存在争论。本实验探讨Notch1-Hes1/Hes2信号通路对肝癌细胞HepG2增殖能力、细胞周期、迁移侵袭能力的影响。
方法：用脂质体转染法分别用含有Notch1胞内段质粒与Notch1干扰RNA转染肝癌细胞HepG2，筛选出稳定的细胞系Notch1过表达细胞、空载体组细胞、Notch1干扰组细胞。MTT比色测定各组细胞增殖能力;流式细胞仪测定各组细胞细胞周期;Transwell检测细胞迁移能力;Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭能力;用RT-PCR检测Notch1、Hes1和Hes2基因的表达;Western印迹法检测Notch1、Hes1和Hes2蛋白的表达。
结果：RT-PCR测定Notch1mRNA水平和Western测定Notch1蛋白表达水平结果表明我们成功转染并筛选出稳定细胞系Notch1过表达细胞、空载体组细胞、Notch1干扰组细胞;MTT结果显示Notch1过表达组细胞相对空载体组及未处理组的细胞增殖能力显著减弱;而干扰组的细胞相对空载体组及未处理组细胞增殖能力明显增强;流式细胞仪结果显示Notch1过表达组相对空载体组及未处理组在G1期细胞明显增多;干扰组相对于对照组在G1期的细胞明显减少。迁移侵袭实验结果显示过表达组相对于空载体组及未处理组迁移侵袭能力减弱;而干扰组相对于对照组迁移侵袭能力增强。RT-PCR及Westernblot实验结果显示过表达组相对于空载体组及未处理组的细胞Hes1和Hes2基因及蛋白表达水平明显升高;干扰组的Hes1和Hes2基因及蛋白表达水平明显降低。
结论：上调Notch1的表达能使Hes1与Hes2表达水平上调，细胞增殖能力减弱，细胞周期停滞，并使细胞迁移侵袭能力减弱;而下调Notch1的表达能使Hes1与Hes2表达下调，细胞增殖增强，促进细胞周期进展，并使细胞迁移侵袭能力增强。