目的前列腺癌（prostate cancer,PCa）,是常见的老年男性泌尿系统恶性肿瘤,具有高发病率、高死亡率的特点。其发病机制多种多样,但其发生发展过程常伴有前列腺癌细胞内基因的异常表达,基因组不规律改变与前列腺癌的产生发展已成为研究前列腺癌致病机制的一大重点。神经纤毛以及类似透拉蛋白2（neuropilin and tolloid-like 2,NETO2）基因位于人类16号染色体,编码单次跨膜糖蛋白,最初研究认为主要表达于脑组织,参与脊椎动物脑部兴奋突触传导。最近的研究认为NETO2可作为促癌基因促进胃癌、胰腺癌、鼻咽癌等癌症的发生发展,但其在前列腺癌中的作用及机制尚不清楚。因此本课题旨在研究NETO2在前列腺癌中的表达水平及临床意义,探索其在前列腺癌中的功能及作用机制。方法利用Sanger Box软件和UALCAN等网站进行生物信息学分析,初步发掘NETO2在前列腺癌中的具体表达情况、与临床因素的关系及预后相关性。采用q RT-PCR和Western blot方法测定NETO2在前列腺癌细胞株中的表达情况;利用si RNA和慢病毒等载体构建下调或过表达NTO2的前列腺癌细胞株,通过MTS实验、单克隆实验、划痕实验、Ed U增殖实验、Transwell侵袭实验、裸鼠皮下成瘤实验等从体内、体外两方面探索NETO2对前列腺癌发生发展中的生物学行为影响;通过转录组测序分析及肿瘤相关分子信号通路节点蛋白的检测,探究NETO2影响前列腺癌生物学功能的可能的分子机制。结果利用生物信息学工具,可以看到在Taylor数据库中NETO2的表达量在癌旁组织、局限前列腺癌、转移性前列腺癌中逐渐增高;格里森评分、临床分期、病理分期、有无淋巴结转移、有无生化复发等临床因素也与NETO2表达水平密切相关;而且,NETO2低表达组预后优于高表达组（P=0.049）。与Taylor数据库的结果一致,TCGA数据库中的前列腺癌癌组织也比癌旁组织拥有更高的NETO2表达水平;高格里森评分组的患者癌组织NETO2表达量也更高;发生淋巴结转移的病患癌组织也较未转移者表达更高NETO2。在m RNA和蛋白水平,PC-3、DU145、C4-2、22-RV1、LN-Cap等实验室常用的前列腺癌细胞株均比前列腺上皮细胞RWPE1表达了更多的NETO2。利用si RNA敲低NETO2表达水平,MTS实验、单克隆集落形成实验、Ed U实验、Transwell侵袭实验及划痕实验等均显示了降低NETO2的表达后前列腺癌细胞的增殖、迁移以及侵袭等生物学特性均受到了抑制。而在构建稳定表达NETO2细胞株进行皮下成瘤实验后也可以得到相似的结果,过表达或沉默可以对应的增强或减弱前列腺癌细胞在裸鼠体内的成瘤能力。稳转株转录组测序结合生物信息学分析,从富集程度评分、显著程度及差异基因的数目等方面评价,细胞衰老（cellular senescence）通路相关基因的变化程度最为显,提示NETO2可能通过调控与细胞衰老有关的通路发挥其功能。WB显示NETO2只调控p53-p21介导的细胞衰老来影响前列腺癌的发生发展,而对另一典型细胞衰老相关通路p16-p RB则无影响。同时,利用β-半乳糖苷酶染色也得到了相同的结果,相较于对照组,沉默NETO2表达后,有更多的肿瘤细胞进入了细胞衰老程序,更多肿瘤细胞呈现蓝色;然而过表达NETO2组进入衰老程序的细胞显著减少。86例临床病例资料对NETO2的临床具体情况进行验证,结果显示NETO2的表达不受患者年龄和术前PSA水平影响,但与格里森评分有关。病理分期≥T2期的患者肿瘤切片NETO2表达也较病理分期<T2的患者高（P=0.006）;有远处转移的患者肿瘤切片中也表达更多的NETO2（P=0.021）。通过Kaplan-Meier方法进行单因素生存分析,NETO2表达水平与PCa病人总体生存率相关（P=0.018）,低表达NETO2的患者拥有更长生存时间,预后更好。结论1、NETO2的表达与前列腺癌病人多种临床特征密切相关,表达升高可提示不良预后。2、下调NETO2可在体外抑制前列腺癌细胞PC-3、C4-2的增殖能力、侵袭能力和迁移能力。3、过表达或沉默NETO2的表达,可相应改变前列腺癌细胞PC-3、C4-2的体内成瘤能力。4、过表达或沉默NETO2,可相应影响前列腺癌细胞PC-3、C4-2的p53-p21蛋白表达水平,NETO2可能抑制p53-p21通路诱导的细胞衰老进而促进前列腺癌发生发展。5、NETO2表达水平与患者预后相关,表达量低者预后比表达量高者好。