益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠心肌miR-133a表达水平的影响

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目的运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术,检测心肌组织中mi R-133a的表达水平探讨益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法12周龄Wistar雄性大鼠60只,随机选取空白组10只,2型糖尿病组50只。2型糖尿病组经高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导造模成功后随机分为5组,即模型组、复方丹参滴丸(DSP)组和益气养阴活血方高、中、低剂量组,每组10只。中药组和DSP组分别进行药物干预5周,空白组和模型组分别给予相应剂量的生理盐水。5周后处死,检测各组空腹血糖(FBG)、体重(BW)及糖化血清蛋白(GSP)、血脂水平,取各组大鼠左室前壁心肌组织,一部分制成切片HE染色后光学显微镜观察心肌细胞形态学改变,另一部分运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术检测心肌组织的mi R-133a表达水平,采用单因素方差分析法进行统计学分析。结果1造模成功:造模后糖尿病各组大鼠出现多饮、多食、多尿、体重减轻等症状,FBG≥16.7mmol/L,符合2型糖尿病成模标准。2一般情况:实验期间,糖尿病组大鼠均出现各种代谢紊乱的症状,体重增加,活动减少,精神欠佳。中药组及DSP组整体状况均有改善,以中药中剂量组最佳。3血糖(FBG)及糖化血清蛋白(GSP):造模后糖尿病各组大鼠FBG、GSP增高,与空白组比较有显著差异(P<0.05)。用药后,与模型组相比各药物干预组FBG、GSP水平均降低;与DSP组比较中药中、低剂量组FBG、GSP下降更明显(P<0.05);中药各组间比较中剂量组FBG、GSP低于高、低剂量组(P<0.05)。4血脂:与模型组比较各药物干预组TC、TG、LDL明显降低,HDL显著升高(P<0.05);与DSP组比较各中药组降TC、TG、LDL效果明显,但二者对HDL作用无显著差异(P>0.05);各中药组之间比较中剂量组降TC、TG、LDL水平更明显(P<0.05),但各组间HDL水平无显著差异(P>0.05)。5心肌组织病理形态学观察:HE染色后,光镜下可见:正常的心肌组织结构清楚,心肌细胞排列整齐,呈短柱状相互平行,细胞核椭圆形,位于中央;模型组心肌细胞排列疏松、紊乱,心肌细胞肥大,甚至变性,可见波浪状改变,并可见心肌断裂,细胞核大小不规则,心肌间质炎性细胞浸润;各治疗组与模型组相比明显好转,尤以中药中剂量组改善明显。6心肌组织mi R-133a表达水平:与模型组相比,各治疗组mi R-133a表达水平均有不同程度的升高(P<0.05);与DSP组比较,各中药组mi R-133a表达水平略有升高(P<0.05);各中药组之间比较无显著差异(P>0.05)。结论1益气养阴活血方可改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢水平,减轻2型糖尿病大鼠心肌损伤。2研究发现,益气养阴活血方中剂量组在降糖调脂方面作用优于高、低剂量组,提示我们在临床实践中应重视药物发挥作用的量效关系,以最合适的剂量达到最优的治疗效果。3益气养阴活血方能够提高糖尿病大鼠心肌mi R-133a表达水平,抑制心肌细胞肥大,且作用优于DSP,提示我们益气养阴活血方对于2型糖尿病心肌损伤的保护作用可能是通过基因水平的调控来完成。
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