目的使用Cre/loxp重组酶系统构建的GABAA受体γ2亚基（GABRG2）基因条件敲除小鼠模型和使用CRISPR/Cas9技术构建的GABRG2基因条件性敲除的神经细胞（HT22）。先通过在体的动物模型去探究GABRG2基因的缺失对皮层、海马区域中的基质金属蛋白酶3（Matrix Metalloproteinase3,MMP3）和海马区域中的神经元可能造成的影响,再通过体外的细胞实验去探究GABRG2基因的缺失对MMP3的影响和之间可能存在的联系。方法1.首先分别鉴定出具有loxp位点表达和Cre酶表达的小鼠,通过交配繁育并对子代再次鉴定,获得子代基因型为GABRG2fl/wtCre+的小鼠,为实验所需要的GABRG2基因条件敲除小鼠模型。获取野生型小鼠和GABRG2基因条件性敲除小鼠的皮层、海马的脑组织蛋白,通过Western blot检测GABRG2,MMP3等相关蛋白表达情况;再获取完整的小鼠脑组织,使用冰冻切片的方式获取组织切片。通过免疫荧光检测GABRG2和MMP3蛋白的表达情况;通过尼氏染色检测神经元形态结构变化。2.利用直肠温度探针法监测37度下GABRG2基因条件敲除小鼠与野生型小鼠脑电情况。3.培养GABRG2基因条件性敲除和正常的神经细胞（HT22）,获取细胞蛋白,通过Western blot检测GABRG2、MMP3、蛋白激酶A（PKA）、磷酸化蛋白激酶A（p-PKA）和核转录因子（NF-κB）的蛋白表达情况。通过细胞免疫荧光检测GABRG2和MMP3蛋白表达情况。结果1.在获取小鼠全基因组DNA后,通过琼脂糖凝胶电泳,得到子代基因型为GABRG2fl/wtCre+的小鼠为实验中使用的模型小鼠。Western blot结果显示,GABRG2条件性敲除小鼠的GABRG2表达显著低于野生型小鼠（P<0.05）,而MMP3的表达显著高于野生型小鼠（P>0.05）。免疫荧光结果显示,在海马和皮层组织中,GABRG2条件性敲除小鼠的GABRG2表达量较野生型小鼠显著降低,而MMP3表达量有升高,特别在海马CA3区表达量明显增加。尼氏染色结果显示,GABRG2条件性敲除小鼠神经元较野生型小鼠的神经元结构松散,神经元离散程度增加。2.脑电结果显示,GABRG2条件性敲除小鼠的脑电波波形的幅度高于野生型小鼠。3.细胞的Western blot结果显示,GABRG2条件性敲除的神经细胞较正常的神经细胞,MMP3、p-PKA、NF-κB的蛋白表达量显著增加（P<0.05）,PKA的蛋白表达量变化不明显（P>0.05）,GABRG2的表达量极低。细胞免疫荧光结果显示,GABRG2条件性敲除的神经细胞较正常的神经细胞的GABRG2蛋白表达量极低,MMP3蛋白表达量显著增加。结论1.GABRG2基因表达的降低会造成MMP3表达量增加。2.MMP3基因的表达可能受到了PKA/NF-κB信号通路上蛋白的调控。