替米沙坦和吡哆胺对自发性高血压大鼠AGEs、RAGE水平及早期肾损害的影响

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目的:探讨AGEs及RAGE在高血压早期肾损害进程中的作用机制;了解单用及合用替米沙坦、吡哆胺对SHR高血压早期肾损害的保护作用并探讨其机制。方法:22周龄雄性SHR大鼠48只随机分为4组。①高血压对照组(HC组)蒸馏水2ml/d灌胃。②替米沙坦组(T组)替米沙坦6mg·kg-1·d-1灌胃。③吡哆胺组(P组)吡哆胺200mg·kg-1·d-1灌胃。④替米沙坦+吡哆胺组(TP组)替米沙坦6mg·kg-1·d-1及吡哆胺200 mg·kg-1·d-1灌胃。同周龄雄性WKY大鼠13只为正常对照组(NC组),蒸馏水2ml/d灌胃。干预16周,于第16周末处死并取材。测定血清AGEs、SOD、MDA水平及尿微量白蛋白排出率。观察肾组织光镜(HE、PAS、Masson染色)及透射电镜下的形态学改变,免疫组化法检测肾组织NF-κBp65、ERK1/2,实时荧光定量PCR检测肾皮质RAGE mRNA水平,Western Blot检测肾皮质TGF-β、RAGE表达水平。SPSS软件统计分析,P<0.05有统计学意义。结果:1.HC组SBP、尿微量白蛋白排出率显著高于NC组(P<0.01),T、TP组SBP及尿微量白蛋白排出率下降(P<0.01),但P组仅有尿微量白蛋白排出率下降(P<0.01),SBP无变化(P﹥0.05)。2.尿微量白蛋白排出率与血清AGEs浓度存在正相关关系(R=0.9758)。3.HC组血清AGEs及肾皮质RAGE mRNA和蛋白质水平显著高于NC组(P<0.01),T、P、TP三组均低于HC组(P<0.01),P、TP组下降比T组更显著(P<0.05)。4.HC组血清SOD活力降低(P<0.05),T、P、TP三组SOD活力较HC组升高(P<0.05),且P、TP组高于T组(P<0.05);HC组血清及肾皮质MDA含量增加(P<0.05),T、P、TP三组含量较HC组降低(P<0.05),且三组间无差别(P﹥0.05)。5.HC组肾小球、肾小管及肾间质出现形态学改变,三组干预组均改善形态学变化。6.免疫组化NF-κBp65半定量结果:HC组显著升高(P<0.01),T、P组较HC显著降低(P<0.01),TP组降低更为显著(P<0.01)。7.免疫组化ERK1/2半定量结果:HC组显著升高(P<0.01),T组较HC组显著降低(P<0.01),P组低于T组,TP组含量最低(P<0.01)。8.HC组TGF-β表达显著升高(P<0.01),T、P、TP三组含量较HC组降低(P<0.01),且三组间无差别(P﹥0.05)。结论:单用替米沙坦、吡哆胺均可显著减少SHR的尿微量白蛋白排出率,改善肾小球及肾间质的形态学改变,与改善氧化应激、降低AGEs-RAGE水平、减少ERK1/2、N?F-κB p65、TGF-β的活化或表达有关。替米沙坦降低SBP,但吡哆胺对SBP无影响。合用二者在减少肾皮质ERK1/2、N?F-κBp65表达方面优于单用,但对尿微量白蛋白排出率及肾皮质TGF-β的干预作用与单用无差别。
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