卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤之一,具有早期不易发现,易转移,预后差的特点,目前死亡率居妇科肿瘤死亡率的首位,其病因至今仍不是很清楚,发病可能与年龄、生育、血型、精神因素及环境等有关。Stanniocalcin1( STC1)是一种糖蛋白激素,以旁分泌或自分泌方式参与机体的多种生理功能,近来的研究发现,STC1在人类肿瘤的发生发展过程中也起着十分重要的作用,但国内外有关STC1与卵巢肿瘤发生与发展的研究报道很少。TSA是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs),在体外对于多种肿瘤细胞系有抑制增殖、诱导凋亡及分化的作用。本实验研究STC1与卵巢癌发生发展的关系,同时研究药物TSA作用后对STC1表达的影响,希望为卵巢癌的基因治疗提供新的靶点及可能的作用机制。目的(1)探讨STC1在卵巢肿瘤组织中是否表达及其临床意义,确定能否作为卵巢癌治疗潜在的分子靶点;(2)检测卵巢癌细胞系A2780与A2780/Taxol中STC1的表达情况,为进一步研究其机制提供实验依据。(3)用药物TSA作用后对卵巢癌细胞系A2780与A2780/Taxol的生物学影响,研究其是否可作为潜在的卵巢肿瘤及其耐药后的治疗。方法(1)采用免疫组织化学SP法检测16例正常卵巢、18例卵巢良性肿瘤、15例卵巢交界性瘤和58例卵巢癌组织中STC1的表达,采用SPSS17.0软件的卡方检验统计方法进行分析。(2)采用细胞免疫组织化学法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及Western blotting检测卵巢癌细胞系A2780与A2780/Taxol中STC1及药物TSA作用后A2780与A2780/Taxol中STC1表达。(3)采用流式细胞术检测卵巢癌细胞系A2780与A2780/Taxol中STC1及TSA作用后A2780与A2780/Taxol中STC1的表达及细胞周期的变化。结果(1)STC1在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤、卵巢交界性瘤、卵巢癌的间质细胞中均有表达。在间质细胞中从正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤、卵巢交界性瘤到卵巢癌,STC1的表达率呈递减趋势,分别为93.8%(15/16)、88.9%(16/18)、80.0%(12/15)和48.3%(28/58),四者间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)STC1在交界性肿瘤的上皮细胞中的表达低于卵巢癌(P<0.05),在卵巢癌中的表达与其分化程度、临床分期以及是否淋巴结转移成负相关(P>0.05),而与组织学分型呈正相关(P<0.05)。(3)细胞免疫组织化学、RT-PCR电泳及Western blotting结果显示STC1蛋白在2种卵巢癌细胞系中均有表达,在用药物TSA作用后其在2种卵巢癌细胞系中表达均下调。(4)流式细胞术结果显示用药物TSA作用后其在2种卵巢癌细胞系中表达均下调,TSA对癌细胞的抑制作用是使细胞停滞在G1/ G2期,伴S期细胞减少。结论(1)STC1在卵巢组织癌变过程中在间质的表达逐渐降低,在卵巢癌细胞的表达逐渐升高,确定其与卵巢癌的发生发展有关,可能成为卵巢癌治疗潜在的分子靶点。(2)STC1在卵巢癌组织中的表达与其组织学分型有关,其在浆液性囊腺癌的表达明显高于粘液性囊腺癌,为探讨其作用机制提供一个思路。(3)STC1在卵巢癌细胞系A2780与其耐药系A2780/Taxol中均表达,表达差异无明显不同,且药物TSA作用后其表达均下降,下降水平两者比较无明显不同,显示STC1的机制可能与紫杉醇耐药无关,TSA可能作为卵巢癌耐药后的治疗,并为进一步研究TSA对STC1表达的影响机制提供了有力的证据。(4)TSA对A2780与其耐药系A2780/Taxol的抑制作用是使细胞生长停滞于G1/ G2期,进一步研究其作用机制可能成为卵巢癌治疗的新药物,尤其可能作为卵巢癌耐药后治疗新的突破口。