研究背景： 鼻咽癌是发生于人鼻咽部的一种恶性肿瘤，主要分布于中国南方，在广东省鼻咽癌的世界人口标化发病率高达男30/10万，女13/10万。流行病学调查显示广东省四会地区、中山市和广西苍梧县为鼻咽癌高发区。自从Old等发现了EB病毒与鼻咽癌的关系以来，就有很多学者提出通过检测EB病毒的血清学标志物来筛查早期鼻咽癌。随着分子生物学技术的日新月异，国内外学者不断提出新的诊断方法。近年来用于鼻咽癌诊断的血清学标志物主要有针对EB病毒感染细胞的壳抗原(VCA)抗体、早期抗原(EA)抗体，还有EB病毒特异性抗原标记物如特异性膜抗原(LMP抗体)、相关核抗原1(EBNA1)抗体，EB病毒特异性DNase抗体等等。 目前，鼻咽癌筛查和监测主要采用VCA/IgA和EA/IgA。但是，在我国南方进行的大规模筛查结果显示，VCA/IgA阳性人群中只有大约百分之十的人发展为鼻咽癌，大部分VCA/IgA阳性人群在十几年的随访研究中没有发展为鼻咽癌。可见，传统的指标VCA/IgA和EA/IgA诊断早期鼻咽癌存在很大的假阳性率。如何降低诊断的假阳性率，提高诊断的准确度是近年研究的重点。 研究目的： 本研究的主要目的是评价EBV DNA及EBV相关抗体的诊断价值，比较各种联合试验方法的诊断价值，探索最优的早期诊断鼻咽癌的组合。 材料与方法： 本研究81例病例均来自中山大学肿瘤医院门诊，经病理确诊的未经治疗的鼻咽癌病人，89例对照来自四会市筛查现场，经初步检查为健康人。分别检测病例和对照EBV DNA、VCA/IgA、EA/IgA、EBNA1/IgA、EBNA1/IgG和ZTA/IgG。采用巢式荧光定量PCR检测EBV DNA，采用免疫酶法检测VCA/IgA和EA/IgA，采用ELISA法检测EBNA1/IgA、EBNA1/IgG和ZTA/IgG。 分别分析各指标的灵敏度、特异度、约登指数以及预测价值。比较各指标的ROC曲线下面积。采用联合试验(并联或者串联)的方式联合各指标，比较各种联合的诊断价值。利用这些指标建立logistic回归模型，以AIC为模型诊断的参数，并将预测概率作为诊断鼻咽癌的指标，比较各种指标组合综合诊断鼻咽癌的诊断价值。模拟筛查人群，计算几种选定方案的检出率和假阳性率以及平均花费，比较几种组合的诊断效果。 采用SAS9.1软件包对数据进行统计分析。采用Wilcoxon两样本检验对病例组和对照组的DNA水平和抗体水平进行比较。ROC曲线的绘制采用SAS软件包中PROC LOGISTIC和PROC GPLOT过程步，曲线下面积的比较采用SAS宏程序﹪ROC完成。ROC曲线下面积采用非参数方法(Bamber，1975)。部分图形的绘制采用R软件。多个指标的联合采用logistic回归模型。 结果： 1．采用WilcoXon两样本检验结果显示各个指标病例组与对照组差别均有显著性统计学意义。不同性别问各个指标差别无统计学意义。相关分析结果显示EBV DNA与VCA/IgA、EA/IgA有相关关系，相关系数分别为0.3127，0.3350。VCA/IgA与EA/IgA的相关系数为0.8230。EBNA1/IgA与EBNA1/IgG的相关系数为0.4191。 2．单个指标比较结果显示VCA/IgA仍然具有最大的灵敏度(95.06﹪，cutoff=1：10)，EBNA1/IgG具有最大的特异度(95.51﹪，cutoff=1)。ROC分析显示：EBNA1/IgA的曲线下面积最大，可能具有较大的诊断价值。EA/IgA的曲线下面积最小。 3．联合试验结果显示：VCA/IgA与EA/IgA并联仍然有较大的灵敏度和特异度。DNA与VCA/IgA、EA/IgA、EBNA1/IgA、EBNA1/IgG串联时特异度均可达到100﹪。 DNA与VCA/IgA并联时灵敏度可达到98.77﹪。DNA与EBNA1/IgG并联时灵敏度可达到93.88﹪，特异度可达到86.52﹪。EBNAl/IgA与VCA/IgA串联时特异度可达到96.63﹪，两者并联时可以检出全部鼻咽癌。 4．运用logistic回归模型综合分析结果显示：DNA与EBNA1/IgA结合，控制性别影响后建立的模型具有较好的拟合优度，并且预测概率的ROC曲线下面积能达到0.98。 5．模拟筛查过程结果显示，与其它方案相比，方案F4：第一步先用VCA/IgA检查，阳性者进行EBNA1/IgA检测，两者均为阳性者，定为阳性，怀疑为鼻咽癌，结果检出率90﹪，假阳性率3.79﹪，平均检出一例花费约739元。 结论： 本研究为横断面研究，收集了一组确诊未治疗的鼻咽癌病人和一组健康对照，检测EBV相关的抗体和DNA。采用非参数的方法比较了病例和对照各个指标的差别。对各项检测计算诊断准确度指标，比较各检测项目的诊断价值。 1．本研究结果显示VCA/IgA、EA/IgA以及其它抗体的灵敏度和特异度与文献研究相近，结果具有可信性。单个指标DNA还不足以适合筛查鼻咽癌，原因有二，第一，此指标存在约10﹪的假阳性率，其二，目前EBV DNA定量的费用还比较昂贵，不适合大规模的人群筛查。 2．EBNA1/IgA与VCA/IgA并联可以将灵敏度提高到100﹪，特异度为84.27﹪。这样的联合结果与传统的VCA/IgA与EA/IgA联合相比，诊断价值有所提高。 3．综合多个指标建立Logistic回归模型，利用预测概率进行诊断可以达到较高的诊断价值，但是这种方式花费较高，不适合于人群筛查，建议供临床诊断参考。 4．模拟实际的筛查过程是一个考察筛查方案优劣的好方法。可以计算出检出率和假阳性率以及粗略的成本，比较多个方案的成本效益，挑选出合适的筛查方案。本研究显示，方案F4(先用VCA/IgA后用EBNA1/IgA)与其他方案比较具有检出率高，假阳性率低，花费低的优点，适合人群筛查。