黄芩苷与利巴韦林联合应用体外抗流感病毒作用

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流感是由流感病毒(Influenza Virus,IFV)引起的人兽共患急性呼吸道传染病,其发病率高,传播快,严重危害人类和动物生命健康。尽管人类对流感的认识已有近百年历史,但现有防治流感的医药技术仍十分薄弱。目前临床使用的抗流感药物主要有金刚烷胺类M2离子通道抑制剂和奥司他韦(Oseltamivir,俗称“达菲”)、扎那米韦(Zanamivir)等神经氨酸酶抑制剂。金刚烷胺临床上应用了多年,多种亚型流感毒株对其已有严重的耐药性,而达菲价格昂贵,且病毒对它耐药性的报道也日渐增多。因此,探索和开发新型有效治疗流感方法具有十分重要的意义。   黄芩苷是黄芩的主要有效成分,属黄酮类化合物,具有抗菌、抗病毒、抗炎等多种药理作用。在临床上,黄芩及其复方制剂清开灵、双黄连等已广泛用于流感防治。文献报道和本课题组研究结果也表明黄芩苷对感染流感病毒小鼠具有显著保护作用。利巴韦林为广谱抗病毒药,临床上常用于流感防治。本文首次对体外联合使用这两种药物的抗流感病毒效果进行了评价,旨在为临床合理用药提供实验依据。   本论文运用CPE法和MTT法测定药物单独应用及联合应用对感染三种不同亚型流感病毒MDCK细胞的保护效果,分别应用合并指数法(Combination Index,CI)和MacSynergyⅡ分析法,分析黄芩苷与利巴韦林联合应用的相互作用情况。通过神经氨酸酶(NA)抑制试验测定黄芩苷对流感病毒NA活性的抑制作用。   合并指数法评价结果表明,黄芩苷与利巴韦林联合应用对H1N1和H5N1亚型流感病毒表现为轻度协同作用,对H9N2亚型流感病毒表现为协同作用。MacSynergyⅡ分析法评价结果表明,黄芩苷与利巴韦林联合应用对H9N2亚型流感病毒表现高度协同作用,对H1N1和H5N1亚型流感病毒表现相加作用。黄芩苷对三种亚型流感病毒NA的半数抑制浓度(IC50)在0.29~0.49mmol·L-1范围。   实验结果表明黄芩苷对流感病毒NA活性具有明显抑制作用。黄芩苷与利巴韦林在体外联合应用,对不同亚型流感病毒的作用效果不同,对H9N2亚型流感病毒表现为显著协同作用,而对H1N1和H5N1亚型流感病毒表现为相加作用。  
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