降钙素对乳鼠成骨细胞增殖及IGF-I表达的影响

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目的:通过不同浓度的鲑鱼降钙素(calcitonin,CT)对离体培养鼠成骨细胞作用的比较,初步探讨鲑鱼降钙素对成骨细胞增殖以及胰岛素样生长因-I(Insulin-like GrowthFactor-I,IGF-I)表达的影响,为促进骨折后的骨修复和再生的临床治疗提供一定的理论依据。方法:取新生24h SD 乳鼠颅盖骨,采用酶消化法培养成骨细胞(osteoblast,OB),经酶解消化后得到原代成骨细胞,进行体外培养并经碱性磷酸酶(ALP)和矿化结节染色(茜素红法)后鉴定。将体外培养的成骨细胞用不同浓度(1×10-12~1×10-8 mol/ L)的CT 干预后,采用MTT 法(噻唑蓝染色法)观察OB的增殖;Gomori 钙-钻法检测碱性磷酸酶(ALP)的表达;RT-PCR 方法观察胰岛素样生长因子-I (IGF-I) mRNA的表达。结果:经细胞鉴定后证实其系成骨细胞;MTT 法检测表明,降钙素浓度为1×10-12 mol/L时就可以刺激OB 增殖,且随CT浓度升高其增殖能力增加,呈剂量依赖关系;Gomori 钙-钻法检测结果表明随着降钙素浓度的升高OB分化能力增强;经RT-PCR 法检测表明,IGF-ImRNA 可在乳鼠成骨细胞内稳定表达,经半定量分析表明,随着降钙素浓度的升高,IGF-ImRNA的表达量逐渐增加。结论:适当浓度的CT 可以促进体外培养成骨细胞的增殖;CT 促进IGF-I表达增加是其作用机制之一。
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