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大高良姜为姜科(Zingiberaceae)山姜属植物大高良姜(Alpinia galanga L.)的干燥根茎,又名大良姜,具有温胃、散寒、行气止痛、祛痰、抗溃疡等功效,常用于胃脘冷痛、伤食吐血等症。大高良姜生于山坡,旷野的草地或灌丛中,广泛分布于东南亚各国(如印度、泰国、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾等),在我国的广东、广西、云南、台湾等地区也都有分布,并已在四川,海南等地移植成功。大高良姜根茎2-3月采挖,除去茎叶及杂质,洗净,切段或切片晒干。现代药理学研究表明,大高良姜具有抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化、降血糖、抗HIV-病毒、胃黏膜保护等作用,并具有良好的黄嘌呤氧化酶抑制作用。据国内外文献报道,大高良姜化学成分主要包括挥发油、二苯庚烷类、苯丙素类、糖苷类等。
目的:通过对大高良姜的化学成分进行系统研究,阐明其药理活性的物质基础。在此基础上,对大高良姜指纹图谱和药理活性进行初步的研究。
方法:大高良姜经95%乙醇提取,浓缩成浸膏,经溶剂分步萃取,应用硅胶柱层析、聚酰胺柱层析、Sephadex LH-20柱层析、ODS柱层析、制备薄层等技术,从大高良姜中分离纯化化学成分,根据其理化性质并运用IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱方法,参考文献报道的数据,鉴定化合物的结构。同时在对大高良姜指纹图谱方法学的初步研究中,采用Agilent TC-C18(2)柱,甲醇-水(0.1%nAc)为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,考察方法的精密度、稳定性、重现性,并比较大高良姜,高良姜(Alpinia officinarumL.)和红豆蔻(Alpinia fructus galanga L.)三者甲醇提取物化学成分的异同。对大高良姜中的苯丙素类化合物的药理活性进行研究。
结果:从大高良姜中分离得到了18个化合物,通过理化常数测定和光谱数据分析等技术鉴定出其中15个化合物的结构,分别为(Ⅰ),二十酸乙酯(Ⅱ),二乙酸.反式.对香豆醇酯(Ⅲ),β-谷甾醇(Ⅳ),反式-对羟基桂皮醛乙酯(V),对乙酰氧基苯丙烯醚(Ⅵ),对乙酰氧基苯丙烯醇(Ⅶ),1-ο-十七烷酸甘油酯(Ⅷ),(Ⅸ),1-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(Ⅹ),二对乙酰氧基苯乙烯甲烷(Ⅺ),反式-对羟基桂皮醛(Ⅻ),对羟基苯甲醛(ⅩⅢ),胡萝卜苷(ⅩⅣ),对羟基桂皮酸(ⅩⅤ),丁二酸(ⅩⅥ),2,5-二羟基苯甲酸(ⅩⅦ),(ⅩⅧ)。优化确定了大高良姜甲醇提取物HPLC的检测分析条件,对大高良姜的指纹图谱做了初步研究。药理活性研究表明,大高良姜中的苯丙素类化合物具有细胞毒,黄嘌呤氧化酶抑制作用。
结论:从大高良姜中分离鉴定了15个化合物,其中化合物Ⅱ,Ⅶ,ⅩⅢ,ⅩⅥ,ⅩⅦ为首次从大高良姜中分离得到。
另外,首次对大高良姜的指纹图谱方法学进行了初步的研究,为今后大高良姜指纹图谱的建立奠定了基础。