Scriptaid对体细胞核移植猪胚胎发育的影响

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tan123456654
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体细胞核移植技术对于动物繁育、地方优良种质资源保存、濒危动物保护以及发育生物学基础理论研究等均具有重要意义,但目前体细胞核移植仍还存在克隆效率低、孕期流产率高、克隆胚胎发育能力差、出生后生长异常、供体和受体同步协调性不一致、克隆动物表型正常而实质异常、理论和技术还很不成熟等问题,这些已成为制约这一技术应用和商业化推广的主要障碍,因此完善体细胞核移植技术体系,探明核移植技术机理乃是当前急需解决的难题。本研究致力于检测一种低毒新型的组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid对体细胞核移植猪胚胎克隆效果的研究,在之前研究的高毒性组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素(TSA)的基础上,使用Scriptaid对体细胞克隆猪胚胎进行不同浓度和不同时间的处理,体外检测胚胎分裂率和发育能力。本试验以对照试验作为基础,以凌源禾丰种猪场长白猪胎儿成纤维作为供体细胞,然后通过体细胞核移植(SCNT)技术获得体外发育胚胎,将重构胚胎用不同浓度(0,200,500,700和900 nmol/L)Scriptaid处理后,并进行不同时间(0,15,36和72 h)的培养,观察不同处理浓度和处理时间下胚胎在2细胞阶段卵裂率、桑椹胚率、囊胚率,同时通过Real-time PCR检测囊胚期对照组与Scriptaid处理组的Oct4,Sox2两个基因的相对表达变化。结果表明:与非处理组相比,用500 nmol/L Scriptaid处理核移植胚胎桑椹胚率和囊胚率最高,分别达到50%和25.9%(P<0.05),各处理组间2细胞分裂率差异均不显著(P>0.05);在不同处理时间上,用500 nmol/L Scriptaid处理15 h后桑椹胚率和囊胚形成率最高,分别达到52%和27%(P<0.05),在处理72 h后桑椹胚率显著低于0 h处理(P<0.05),囊胚形成率呈现降低趋势(0.05
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