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[目的]通过免疫组织化学方法(IHC)和实时荧光定量PCR实验(RT-PCR)检测胶质瘤及正常脑组织中ATRX和TERT的表达,结合基因测序分析其表达与肿瘤WHO分级、患者年龄、患者性别之间的关系;为ATRX和TERT启动子在脑胶质瘤的实验研究和临床应用中提供一些建议。[方法]1.选取30例WHO Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的星形胶质细胞瘤蜡块标本,颅脑外伤患者正常脑组织标本3例制成蜡块标本,切片后行HE染色,比较其肿瘤特性。通过IHC法分别检其ATRX和TERT的表达。Sanger测序检测ATRX和TERT启动子的突变状态。2.选取21例WHO Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的星形胶质细胞瘤临床标本,颅脑外伤患者正常脑组织标本3例,经RT-PCR测定ATRX、TERT启动子在核苷酸水平的表达。3.使用IHC法和RT-PCR法的检测结果,经SPSS 20.0和GraphPad Prism 5统计分析,分别比较ATRX、TERT在核苷酸水平和蛋白质水平的表达及基因突变状态与肿瘤WHO分级、患者年龄及性别之间的关系;比较分析胶质瘤中ATRX、TERT表达的相关性及相关程度。[结果]1.IHC及测序结果:(1)HE染色表明,肿瘤组织标本中的癌细胞浸润较正常脑组织标本明显增多,并且存在明显的异形性;(2)肿瘤组织ATRX和TERT在蛋白质水平的表达明显高于正常脑组织(P<0.05));(3)按照WHO Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级将肿瘤组织分为三组,结果表明:ATRX突变与WHO分级存在负相关关系(P<0.05),TERT启动子突变与WHO分级存在正相关关系(P<0.05);(4)按照35岁及以下、35-54岁、55岁及以上将肿瘤组织分为A、B、C三组,结果表明:ATRX突变与年龄分级存在负相关关系(P<0.05);不同年龄分组之间,TERT启动子突变无明显差异(P>0.05);(5)按照性别将肿瘤组织分为男、女两组,结果表明:ATRX突变和TERT启动子突变均无明显性别差异(P>0.05);2.RT-PCR实验结果:(1)肿瘤组织ATRX和TERT在核苷酸水平的表达与正常脑组织相比明显上调(P<0.05);(2)按照WHO Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级将肿瘤组织分为三组,结果表明:ATRX表达与WHO分级存在正相关关系(P<0.05),TERT表达与WHO分级存在负相关关系(P<0.05);(3)按照35岁及以下、35-54岁、55岁及以上将肿瘤组织分为A、B、C三组,结果表明:ATRX表达与年龄分级存在正相关关系(P<0.05);TERT表达与年龄分级存在负相关关系(P<0.05);(4)按照性别将肿瘤组织分为男、女两组,结果表明:ATRX和TERT表达均无明显性别差异(P>0.05);3.两种方法(IHC和RT-PCR法)在胶质瘤ATRX和TERT表达方面的检测数据一致性较好(P<0.05);4.ATRX和TERT表达相关性及相关程度:(1)IHC实验:ATRX和TERT的表达存在负相关关系(P<0.05);(2)RT-PCR实验:ATRX和TERT的表达存在显著的负相关关系(P<0.001)。[结论]1.胶质瘤中,ATRX、TERT无论是在核苷酸水平的表达还是蛋白质水平的表达均明显高于正常脑组织。2.ATRX突变率随胶质瘤级别的上升而降低,ATRX突变在低龄人群中较高,但会随着年龄增加而降低,ATRX突变与性别无关;TERT启动子突变率随胶质瘤级别的上升而升高,TERT启动子突变在低龄人群中较低,但会随着年龄的增加而升高,TERT启动子突变与性别无关。3.ATRX的表达随胶质瘤级别的上升而升高,而低龄人群中表达较低,但会随着年龄增加而增加,ATRX表达与性别无关;TERT的表达随胶质瘤级别的上升而降低,而低龄人群中表达较高,但会随着年龄的增加而降低,TERT表达与性别无关。4.使用IHC法和RT-PCR法来检测胶质瘤中ATRX和TERT的表达,其结果一致性较好。5.胶质瘤中,ATRX的表达和TERT的表达可能存在负性相关的关系,ATRX突变与TERT启动子突变很可能相互排斥。