【摘 要】
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目的:研究缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）对人肺腺癌A549细胞株及人小细胞肺癌H446细胞株的凋亡、增殖及转移的影响,以及HIF-1α表达与葡萄糖转运蛋白1（glucose transporters 1,GLUT-1）、Livin和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（cysteinyl asparta te-specific proteas
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目的:研究缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）对人肺腺癌A549细胞株及人小细胞肺癌H446细胞株的凋亡、增殖及转移的影响,以及HIF-1α表达与葡萄糖转运蛋白1（glucose transporters 1,GLUT-1）、Livin和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（cysteinyl asparta te-specific protease-3,Caspase-3）表达的关系。方法:1.常规培养A549、H446细胞,通过转染含有HIF-1α基因的质粒过表达HIF-1α基因,筛选干扰序列干扰HIF-1α基因表达,将对数生长期细胞分别随机分成对照组、HIF-1α过表达组与HIF-1α干扰组。2.应用Annexin V-PI凋亡检测试剂盒及流式细胞仪检测细胞凋亡;应用Transwell小室检测各组细胞迁移及侵袭;Real-Time PCR及Wester n Blot检测各组GLUT-1、Livin、Caspase-3表达。结果:1.A549细胞:HIF-1α过表达组较对照组,凋亡显著减少,迁移及侵袭细胞数明显增多,GLUT-1和Livin m RNA及蛋白表达均明显增多,Ca spase-3 m RNA及蛋白表达明显减少（P<0.05）;HIF-1α干扰组较对照组,晚期凋亡细胞明显增多,迁移及侵袭细胞数均显著减少,GLUT-1及Livi n在m RNA及蛋白水平表达均明显减少,Caspase-3 m RNA表达显著增多（P<0.05）,而蛋白表达无统计学差异（P>0.05）。2.H446细胞:HIF-1α过表达组与对照组比较,细胞凋亡、侵袭无统计学差异（P>0.05）,细胞迁移明显增多,GLUT-1和Livin在m RNA及蛋白水平表达均明显增多（P<0.05）,Caspase-3蛋白表达明显减少（P<0.05）,但其m RNA表达无统计学差异（P>0.05）;HIF-1α干扰组较对照组,凋亡显著增多,迁移及侵袭细胞数均显著减少,GLUT-1 m RNA及蛋白表达显著减少,Caspase-3在m RNA及蛋白水平表达显著增多（P<0.05）,Livin蛋白表达显著减少（P<0.05）,其m RNA表达无统计学差异（P>0.05）。结论:1.对于小细胞肺癌及肺腺癌的肿瘤细胞,抑制HIF-1α表达均可以通过增加凋亡、减少迁移与侵袭以达到抑制肺癌肿瘤细胞发展、转移的效果。2.肺癌细胞中HIF-1α与GLUT-1及Livin的表达呈正相关,Caspase-3与HIF-1α、Livin的表达呈负相关,可能是通过抑制HIF-1α表达以下调GLUT-1及Livin、上调Caspase-3表达。3.本实验证明HIF-1α的表达与肺癌的生长、浸润、转移等生理过程关系密切,提示HIF-1α可能是肺癌治疗的有效靶点。
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