【摘 要】
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社会的进步,人类文明的发展高度依赖于能源的供给,然而当今人类能源供给的主要来源是石油、煤等不可再生的化石类燃料。随着人类文明这几个世纪的快速发展,导致了世界性能源
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社会的进步,人类文明的发展高度依赖于能源的供给,然而当今人类能源供给的主要来源是石油、煤等不可再生的化石类燃料。随着人类文明这几个世纪的快速发展,导致了世界性能源供应经常出现缺口和危机。因此可再生能源的研究已成为当今社会发展的重中之重。目前微藻由于具有培养周期短、产油效率高、油脂质量好、环保优势强、占地面积小、改造空间大等优点,其有望成为生产可再生能源的重要原料。但是现在对于微藻产油机理的研究还只是出于基础阶段。本文主要就是通过对在莱茵衣藻中Cr-SKP1、Cr-UBCc、Cr-zf-LSD1三个基因在油脂代谢途径中的功能进行研究。克隆上述基因的干涉片段构建RNAi载体,并将其通过玻璃珠法转入莱茵衣藻。检测目标基因的表达量变化和油脂含量变化,结果发现Cr-SKP1、Cr-UBCc、Cr-f-LSD1三个基因干涉后转化子目标基因的表达量明显下降,油脂含量明显下降,生物量基本保持不变。克隆上述基因的全长构建过表达载体、亚细胞定位载体、同样通过玻璃珠法转入莱茵衣藻。在过表达转化子中检查目标基因的表达变化和油脂含量变化,结果发现Cr-SKP1、Cr-UBCc、Cr-zf-LSD1三个基因过表达转化子目标基因的表达量明显上升,油脂含量明显上升,生物量基本保持不变。在亚细胞定位转化子中,通过显微镜观察可以看出这三个基因的产物全部定位于细胞核,在细胞核内发挥着其功能。本研究初步证实了 Cr-SKP1、Cr-UBCc、Cr-zf-LSD1三个基因在莱茵衣藻油脂积累中具有在不影响生物量的同时促进了油脂的积累的功能,并为进一步的研究这3个基因在莱茵衣藻中油脂代谢调控中的作用提供了一定帮助。
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