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目的:探讨法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)在齐墩果酸诱导的小鼠胆汁淤积型肝损伤中的作用。方法:将雄性野生型小鼠(wild type,WT)和雄性FXR敲除小鼠(FXR-/-)随机分为空白组(玉米油,C),齐墩果酸低剂量组(457 mg/kg,L)和齐墩果酸高剂量组(685.5 mg/kg,H)。每天定时灌胃一次。分别在齐墩果酸单次给药3 h后以及齐墩果酸连续给药4天,末次给药3 h和末次给药24 h后取材。采用生化试剂盒检测血清生化指标;HE染色观察肝组织形态变化;采用UPLC-MS技术分析肝组织、血清及胆汁中胆汁酸组分变化;RT-PCR检测胆汁酸相关基因表达以及采用Western blot法检测BSEP膜蛋白表达。结果:1.齐墩果酸连续给药4天,末次给药24 h:WT小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组ALT、AST、ALP及TBA水平升高,病理见肝细胞大面积坏死。FXR-/-小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组ALT、AST和ALP水平升高,病理见肝细胞肿胀。与WT小鼠齐墩果酸高剂量组比较,FXR-/-小鼠齐墩果酸高剂量组ALT、AST、ALP及TBA水平降低,提示FXR-/-小鼠肝损伤比WT小鼠轻。UPLC-MS结果显示:齐墩果酸给药后WT小鼠和FXR-/-小鼠肝脏、血清以及胆汁中胆汁酸均以结合型胆汁酸为主。WT小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组血清中结合型胆汁酸(TCA、TUDCA、TCDCA、T-βMCA)含量增加,胆汁中结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TCDCA)含量降低,肝脏中结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量增加;FXR-/-小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组血清中结合型胆汁酸(TCA、TUDCA、TCDCA、T-βMCA)含量增加,胆汁中结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TCDCA)含量降低,肝脏中结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量增加;与WT小鼠齐墩果酸高剂量组比较,FXR-/-小鼠齐墩果酸高剂量组血清中结合型胆汁酸(TCA、TUDCA、TCDCA、T-βMCA)含量降低,胆汁中结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TCDCA)含量增加,肝脏中结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量增加。胆汁酸相关基因检测及蛋白印迹实验结果显示:WT小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组Fxr m RNA表达下调,胆汁酸外排转运体Bsep、Mdr2、Mrp2 m RNA表达下调,Ostβm RNA表达上调,胆汁酸解毒酶Cyp3a11、Ephx1、Ugt2b5 m RNA与结合酶Bacs、Baat m RNA表达下调,BSEP蛋白表达下调;FXR-/-小鼠Fxr m RNA基本不表达,FXR-/-小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组Bsep、Mdr2、Mrp2、Bacs、Baat m RNA表达下调,Cyp2b10、Ephx1、Ugt1a1 m RNA表达上调,BSEP蛋白表达下调;与WT小鼠齐墩果酸高剂量组比较,FXR-/-小鼠齐墩果酸高剂量组Bsep、Bacs、Baat、Cyp3a11、Cyp2b10、Ephx1、Ugt1a1、Ugt2b5 m RNA及BSEP蛋白表达增加。2.齐墩果酸连续给药4天,末次给药3 h:WT小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组ALT水平升高,AST、ALP及TBA水平有升高趋势,病理可见肝细胞点灶性坏死、炎性细胞浸润。FXR-/-小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组ALT与AST水平有升高趋势,ALP及TBA水平升高,病理见肝细胞肿胀。与WT小鼠齐墩果酸高剂量组比较,FXR-/-小鼠齐墩果酸高剂量组ALT、AST、ALP及TBA水平无变化。肝脏中胆汁酸检测结果显示:WT小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组游离型胆汁酸(CA、DCA、UDCA、βMCA)含量降低、结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量增加;FXR-/-小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组游离型胆汁酸(CA、DCA、UDCA、βMCA)含量降低、结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量增加;与WT小鼠齐墩果酸高剂量组比较,FXR-/-小鼠齐墩果酸高剂量组游离型胆汁酸(CA、DCA、UDCA、βMCA)与结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA)含量增加,但TCDCA与T-αMCA含量有降低趋势。3.齐墩果酸单次给药3 h:WT小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组ALT水平升高,AST和TBA水平有升高趋势,肝脏病理提示炎性细胞浸润。FXR-/-小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组ALT、AST和TBA水平无显著变化,肝脏病理无明显变化。与WT小鼠齐墩果酸高剂量组比较,FXR-/-小鼠齐墩果酸高剂量组ALT、AST及TBA水平无变化。肝脏中胆汁酸检测结果显示:WT小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组游离型胆汁酸(DCA、UDCA、CDCA、α/βMCA)和结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量增加;FXR-/-小鼠中,与空白组比,齐墩果酸高剂量组游离型胆汁酸(DCA、UDCA、CDCA、α/βMCA)和结合型胆汁酸(TCA、TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量增加;与WT小鼠齐墩果酸高剂量组比较,FXR-/-小鼠齐墩果酸高剂量组游离型胆汁酸(DCA、UDCA、CDCA、αMCA)和结合型胆汁酸(TDCA、TUDCA、TCDCA、T-α/βMCA)含量降低。结论:FXR基因敲除后可减轻齐墩果酸诱导的胆汁淤积型肝损伤。其可能与FXR敲除后Bsep、Bacs、Baat、Cyp3a11、Cyp2b10、Ephx1、Ugt1a1、Ugt2b5 m RNA表达增加,肝脏和血清中结合型胆汁酸含量降低,胆汁中结合型胆汁酸含量增加有关。