论文部分内容阅读
本研究以控制Belclare、Cambridge、Hanna和Inverdale绵羊高繁殖力的骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)基因及控制Belclare和Cambridge绵羊高繁殖力的生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因为候选基因,根据绵羊BMP15和GDF9基因全序列各设计6对引物覆盖全部的外显子,采用PCR-SSCP方法检测BMP15基因和GDF9基因外显子1和外显子2在小尾寒羊和多赛特羊中的多态性,同时研究这两个基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。 对于GDF9基因,结果表明:只有外显子2的第1对和第2对引物扩增片段在两个绵羊品种中均具有多态性,其余4对引物均不具有多态性。对于引物2-1,在126只小尾寒羊母羊和30只多赛特母羊中都检测到3种基因型(AA、AB、BB);统计结果表明:小尾寒羊、多赛特羊从基因型频率分别为0.302、0.100,AB基因型频率分别为0.603、0.467,BB基因型频率分别为0.095、0.433;测序结果表明:BB型和AA型相比在GDF9基因外显子2第477位碱基处发生1个突变(G→A),小尾寒羊和多赛特绵羊都产生了与Belclare、Cambridge绵羊相同的477G→A突变,该突变没有导致氨基酸的改变;小尾寒羊产羔数的最小二乘均值关系为AA>AB>BB,但3种基因型间差异不显著(P>0.05)。对于引物2-2,在126只小尾寒羊母羊和30只多赛特母羊中都检测到2种基因型(CC、CD);统计结果表明:小尾寒羊、多赛特羊CC基因型频率分别为0.817、0.933,CD基因型频率分别为0.183、0.067;测序结果表明:CD型和CC型相比在GDF9基因外显子2第729位碱基处发生1个突变(G→T),该突变导致243位氨基酸由谷氨酰胺改变为组氨酸;CD基因型小尾寒羊平均产羔数比CC基因型多0.77只,差异极显著(P<0.01)。本研究结果初步表明GDF9基因可能是控制小尾寒羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的分子标记。 对于BMP15基因,结果表明:只有外显子1的第1对引物扩增片段具有多态性,其余5对引物扩增片段都没有多态性。在127只小尾寒羊母羊和30只多赛特母羊中都检测到两种基因型(AA、AB)。统计结果表明:小尾寒羊、多赛特羊AA基因型频率分别为0.638、0.800,AB基因型频率分别为0.362、0.200。测序结果表明:AB型和AA型相比在cDNA第28bp处缺失了3个碱基(CTT),小尾寒羊和多赛特绵羊都发生了与Belclare、Cambridge、Hanna和Inverdale绵羊相同的CTT缺失突变。AB基因型小尾寒羊平均产羔数比AA基因型多0.20只,但差异不显著(P>0.05)。研究结果表明BMP15基因的CTT缺失突变对小尾寒羊的高繁殖力没有显著影响。