香菇（Lentinusedodes）是产量仅次于双孢菇的世界第二大食用菌栽培菌种，是一种重要的药食两用真菌，不但具有很高的营养价值，而且还具有许多重要的医药保健功能，有着广阔的国内国际市场，潜力巨大。目前香菇的品种选育技术还是较多的采取传统的诱变杂交等育种方法，利用转基因等分子生物学技术选育香菇新品种的研究还处于起步阶段，同时香菇的全基因组测序工作尚未完成，基因功能方面仍未有成熟的研究手段。本论文运用PEG介导转化法和根癌农杆菌介导转化法对香菇菌株申香10号进行了外源基因的转化，根据T-DNA随机插入的特点建立一个小规模的T-DNA插入突变体库，采用正反向遗传学相结合的策略对突变株进行基因水平的研究，深入了解基因的功能。　　 1、以质粒载体pCAMBIA1302为骨架构建了含有香菇强启动子gpd和拟康氏木霉Swollenin基因的双元载体pLGS，通过潮霉素敏感性实验确定实验中初筛的潮霉素浓度为10μg/mL，复筛时的浓度为15μg/mL。采用PEG介导转化法对香菇菌株申香10号进行转化，经PCR和点杂交验证swo已经整合到香菇基因组中，并且能够稳定遗传，但是转化率比较低，假阳性率高，仅为1个转化子/μgDNA。将得到的香菇转化株进行栽培试验，转化株1能够表现出一些优良的生物学性状，生长速度达到0.37cm/d，比原菌株提高了32.14％，产量达到578.36g/袋，与原菌株相比提高了4.68％，平均单菇重量达到58.34g。　　 2、构建含有香菇同源gpd启动子的双元载体pLGF，将该载体导入农杆菌EHA105后，与香菇菌株申香10号的菌球进行共培养，获得稳定的具有潮霉素抗性的转化株，建立起具有122个转化株的小型的T-DNA突变体库，并进行了分子验证。同时在不同的转化条件下(农杆菌浓度OD660为0.2-0.5，AS浓度为200-300μM，共培养时间为2-4d)香菇的转化率不同，同PEG转化法相比，转化率明显提高，达到18-20％，假阳性率低。　　 3、根据发表的真菌三条简并引物和T-DNALB与RB区序列设计的特异引物，用简并引物与特异引物组合采用TAIL-PCR的方法对农杆菌介导转化获得的转化株T-DNA插入位点的侧翼序列进行克隆，三轮PCR后会得到0.7-1.0kb大小的片段30个，其中22个的转化株和引物组合都能获得清晰的条带进行测序，并将得到的序列进行Blast分析比对，其中简并引物AD3与LB区的特异引物组合和其中的一个转化子可以扩增出的0.7kb片段，和樟芝的mnsod基因有一定的同源性，但是相似度不高，仅为4％。