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目的:通过免疫组化S-P法检测HIF-1、MGMT、CD133在人胶质母细胞瘤中的表达,应用RT-PCR法测定HIF-1、MGMT、CD133在胶质母细胞瘤细胞中的mRNA的表达,探讨三者在胶质母细胞瘤中的表达相关性。
方法:收集自2010年12月至2012年12月手术切除病理证实的胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)33例,同期收集低级别胶质瘤25例(WHOⅠ-Ⅱ级)作为对照组,收集脑深部肿瘤皮层造瘘正常脑组织5例,作为阴性对照组。采用免疫组织化学S-P法检测HIF-1、MGMT、CD133在人脑胶质母细胞瘤、低级别胶质瘤及正常脑组织中的表达;应用RT-PCR法测定HIF-1、MGMT、CD133在胶质母细胞瘤细胞、低级别胶质瘤中的mRNA的表达,统计软件选用SPSS13.0,计量资料采用卡方检验。相关统计分析采用Spearman等级相关分析。以α=0.05为检验水准,当P<0.05时具有统计学意义。
结果:免疫组织化学S-P法检测33例胶质母细胞瘤,其中HIF-1阳性表达32例(96.7%),MGMT阳性表达23例(69.7%),CD133阳性表达33例(100%),均阳性表达23例(69.7%)。对照组25例低级别胶质瘤中HIF-1阳性表达9例(36.0%),MGMT阳性表达8例(32.0%),CD133阳性表达8例(32.0%),均阳性表达4例(16.0%)。在正常脑组织中HIF-1、MGMT、CD133均阴性表达。可见随肿瘤级别升高,HIF-1、MGMT、CD133表达显著升高,具有统计学意义(P<0.05)。应用RT-PCR法测定HIF-1、MGMT、CD133在低级别胶质瘤及胶质母细胞瘤中mRNA的表达,其中HIF-1mRNA在低级别胶质瘤中相对定量0.23±0.05,在胶质母细胞瘤中相对定量0.87±0.12; MGMT mRNA在低级别胶质瘤中相对定量0.27±0.07,在胶质母细胞瘤中相对定量0.67±0.09; CD133 mRNA在低级别胶质瘤中相对定量0.16±0.05,在胶质母细胞瘤中相对定量0.57±0.08。相关性分析发现HIF-1与MGMT r=0.91 P<0.05,HIF-1与CD133 r=0.85 P<0.05,MGMT与CD133 r=0.802 p<0.05,提示三者均存在强正相关性。
结论:随肿瘤级别升高,HIF-1、MGMT、CD133阳性表达率升高。CD133为已经明确的肿瘤干细胞标志物,HIF-1则能使胶质瘤细胞尤其是脑胶质瘤干细胞在缺氧条件下仍能保持生长、分裂活性,对于胶质瘤干细胞的自我分化、更新、代谢及细胞凋亡均有重要作用,MGMT作为高级别脑胶质瘤术后化疗方案选择的重要参考指标。三者的相关性研究提示HIF-1与MGMT、HIF-1与CD133、MGMT与CD133均存在强正相关性。提示在胶质母细胞瘤的发生、发展、复发、预后中三者存在协同作用,通过干预不同因子的表达,为胶质母细胞瘤的治疗提供新的思路及方向。