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多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄女性常见的的内分泌紊乱伴生殖功能障碍性疾病,其病因和病理机制尚未完全阐明。近年来的研究表明,PCOS是卵母细胞源性疾病,其内分泌异常可能是由卵巢启动。卵母细胞源性生长分化因子-9(growth differentiation factor-9,GDF-9)和骨形成蛋白-15(bone morphogenetic protein 15,BMP-15)是调控卵泡发育的关键因子,对卵母细胞自身发育、卵泡内环境的稳定及生殖功能具有重要作用。已有研究认为,GDF-9、BMP-15可能是参与PCOS卵泡发育异常的重要因素之一;GDF-9、BMP-15可能参与了卵巢反应的发生过程。因此,探讨卵母细胞源性生长因子在控制性超排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)过程对PCOS卵泡发育、卵巢反应性和体外受精-胚胎移植(in-vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)结局的的影响,分析可能的病理机制,可以为改善PCOS不孕患者的生殖功能提供理论依据。目的:通过检测颗粒细胞GDF-9、BMP-15 mRNA及卵泡液GDF-9、BMP-15蛋白的表达,分析PCOS患者在COH过程中GDF-9、BMP-15与对照组的表达差异,及其与卵巢反应性、IVF-ET治疗结局的关系,探讨可能的病理机制,为改善PCOS不孕患者的助孕结局提供理论依据。方法:选择行IVF-ET治疗的PCOS患者75例为PCOS组,同期输卵管性因素不孕患者150例作为对照组。收集IVF-ET患者取卵后的卵泡液和颗粒细胞,应用免疫组化法检测颗粒细胞GDF-9、BMP-15的定位表达,分别应用Real-time PCR和Western blot技术测定颗粒细胞GDF-9、BMP-15 mRNA及卵泡液GDF-9、BMP-15蛋白的表达。比较PCOS组与对照组gdf-9、bmp-15的表达差异,应用pearson相关分析、logistic回归分析探讨gdf-9、bmp-15表达与卵巢反应性及ivf-et结局的关系;应用roc曲线判断gdf-9、bmp-15预测临床妊娠的价值。结果:1、coh过程pcos组卵巢高反应25例、正常反应38例、卵巢低反应12例,对照组卵巢高反应43例、正常反应77例、卵巢低反应30例。两组卵巢反应构成无统计学差异(p>0.05)。pcos患者获卵率、卵子成熟率、正常受精率显著低于对照组,取消移植率显著高于对照组(p<0.05);两组的胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率无显著性差异(p>0.05)。2、gdf-9、bmp-15在pcos组和对照组颗粒细胞胞质中均呈阳性表达。pcos组颗粒细胞gdf-9、bmp-15mrna表达量及卵泡液gdf-9、bmp-15蛋白水平均显著低于对照组(p<0.01)。3、颗粒细胞gdf-9mrna表达量、卵泡液gdf-9蛋白水平在pcos卵巢高反应组>正常反应组>低反应组(p<0.05);颗粒细胞bmp-15mrna表达量、卵泡液bmp-15蛋白水平在pcos卵巢不同反应组比较无显著性差异(p>0.05)。对照组卵巢不同反应患者颗粒细胞gdf-9mrna表达量、卵泡液gdf-9蛋白水平比较,卵巢高反应组>正常反应组>低反应组(p<0.05);颗粒细胞bmp-15mrna表达量、卵泡液bmp-15蛋白水平在对照组卵巢低反应患者中的表达水平显著高于高反应、正常反应患者(p<0.05)。pearson相关分析显示,获卵数与afc、颗粒细胞gdf-9mrna表达量及卵泡液gdf-9蛋白水平呈正相关(p<0.05),与年龄、卵泡液bmp-15蛋白水平呈负相关(p<0.05);logistic回归分析显示窦卵泡数(antralfolliclecount,afc)、颗粒细胞gdf-9mrna表达量、卵泡液gdf-9蛋白水平是卵巢高反应的主要影响因素;年龄、颗粒细胞bmp-15mrna表达量及bmp-15蛋白水平是卵巢低反应的主要影响因素。4、鲜胚移植周期pcos组临床妊娠19例、未妊娠25例;对照组临床妊娠50例、未妊娠59例。临床妊娠组颗粒细胞gdf-9、bmp-15mrna表达量显著上调,卵泡液gdf-9、bmp-15蛋白水平显著高于未妊娠组(p<0.05)。pearson相关分析显示卵子成熟率与gdf-9mrna表达量、卵泡液gdf-9及bmp-15蛋白水平呈正相关,优质胚胎数与年龄呈负相关,与卵泡液GDF-9蛋白水平呈正相关。ROC曲线表明颗粒细胞GDF-9、BMP-15 mRNA表达量及卵泡液GDF-9、BMP-15蛋白水平可以预测临床妊娠(AUC分别为0.667,0.646,0.836,0.807,P<0.05)。结论:1、IVF-ET过程PCOS患者获卵率、卵子成熟率、正常受精率显著降低,GDF-9、BMP-15表达显著下降。GDF-9、BMP-15是参与PCOS患者卵泡发育障碍的重要因素之一。2、GDF-9是影响卵巢高反应的主要因素,BMP-15是影响卵巢低反应的主要因素,二者参与了PCOS卵巢反应的发生过程,二者的适量表达可能是控制PCOS患者卵巢反应性的一个靶点。3、高水平的GDF-9、BMP-15预示良好妊娠结局,卵泡液GDF-9、BMP-15蛋白水平对预测临床妊娠具有一定的价值。