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目的：细胞因子信号转导抑制因子(suppressor of cytokine signaling,SOCS)是最新发现的一类新型免疫分子。其通过在JAK/STAT通路的负调节发挥生物学作用。SOCS作为一种潜在的抑癌基因,其表达会因DNA的甲基化而沉默。SOCS基因的异常甲基化与多种肿瘤的发生、发展密切相关。本研究通过荧光定量RT-PCR法测定SOCS-1和SOCS-3基因在结肠癌组织中的表达水平,并通过甲基化特异性PCR法检测其CpG岛甲基化状态。以期探讨SOCS-1和SOCS-3在结肠癌发生、发展中的作用。
材料和方法：收集10例人正常结肠组织、20例人结肠癌组织和20例癌旁组织。分别提取总RNA后应用实时荧光定量RT-PCR法测定其中SOCS-1和SOCS-3基因的表达水平。利用亚硫酸氢盐可以使未甲基化的胞嘧啶转为尿嘧啶而不改变甲基化胞嘧啶的特性,分别设计甲基化引物和非甲基化引物,应用甲基化特异性聚合酶链式反应,分别检测各组组织中SOCS-1和SOCS-3的CpG岛甲基化状态。最后统计分析结肠癌组织中SOCS-1和SOCS-3基因甲基化状态与结肠癌患者临床资料之间的关系。
结果：实时荧光定量RT-PCR检测结果表明:与正常结肠组相比,20例结肠癌组织中,13例(65％)有SOCS-1基因的表达降低或缺失,17例(85%)有SOCS-3基因的表达降低或缺失(P＜0.05)；癌旁组织及正常结肠组织均检测到SOCS-1和SOCS-3表达,二者表达水平无显著差异(P＞0.05)。甲基化特异性PCR检测结果表明:20例结肠癌组织中,13例(65%)有SOCS-1基因CpG岛的异常甲基化,16例(80%)有SOCS-3基因CpG岛的异常甲基化,与其基因表达的减少或缺失相一致；癌旁组织中分别为1例(5%)和2例(10%)；在正常结肠组织中没有检测到SOCS-1和SOCS-3基因CpG岛的甲基化。结肠癌中SOCS-1和SOCS-3基因甲基化与临床资料的关系分析结果表明:SOCS-1基因CpG岛甲基化与性别、年龄无关(P＞0.05),而与肿瘤病理分级和TNM分期有关(P＜0.05)；SOCS-3基因甲基化与以上各项临床资料均未表现出明显的相关性。
结论：本研究结果提示结肠癌中SOCS-1和SOCS-3基因表达降低或缺失；并常发生SOCS-1和SOCS-3启动子CpG岛异常甲基化,且与其基因表达降低或缺失相一致。结肠癌中SOCS-1和SOCS-3基因CpG岛的甲基化可能导致其基因表达的降低或缺失,从而可能导致JAK/STAT信号传导通路的活化,进而可能在结肠肿瘤的发生、发展可能中起到重要作用。SOCS-1可能参与了结肠癌的进展和转移。