用重组大肠杆菌JM109生产顺3,5-二羟基-1,2-环己二烯(DHCD)和聚对苯(PPP)的合成

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顺-3, 5-二羟基-1, 2-环己二烯(简称DHCD)是化学合成高性能材料1,4-聚苯的单体,在航天业,电子工业,医药业以及精细化工业均有一定应用。本论文研究了DHCD的发酵生产工艺和提取方法,并合成出聚苯对其性质进行研究。在DHCD的发酵生产方面,通过正交实验确定合适的初始培养基浓度配方,并研究了IPTG浓度及底物苯的供给方式对DHCD产量的影响。研究发现:发酵初期采用37oC的最佳生长温度,流加葡萄糖控制乙酸累积使菌体快速生长,转化期将温度降至酶最佳催化温度30oC,0.5mM IPTG诱导甲苯双加氧酶基因的表达,以液体石蜡作为缓释剂,与苯以3:1混合流加,最终DHCD产量达到45 g/L。由于DHCD在高温和酸性条件下的不稳定性,以及在水中的溶解度较大,现有的溶剂萃取工艺的提取效率很低。本论文开发出用大孔吸附树脂从发酵液中提取DHCD的工艺,进行了树脂的筛选,测定了各种吸附动力学参数,并考查了流速和溶液中葡萄糖浓度等因素对吸附能力的影响。最终选择了极性的NKA-II树脂作为吸附剂,采用1.2 ml/min的流速,用甲醇作为洗脱剂对DHCD发酵液进行提取,使提取率达到82.2%。本论文用提取的DHCD合成出分子量为20,000的聚苯,通过傅立叶红外和拉曼光谱肯定了产物的结构。通过加入三氯化铁的硝基甲烷溶液在60oC下进行液相掺杂,使得产物具有导电性,电导率为0.1 S/m。最后还尝试了使用电纺丝的方法对聚苯进行成型加工。
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